การกำหนดพันธุ์เนื้อสัตว์โดยวิธีตกตะกอน การกำหนดกรุ๊ปเลือด วิธีการทางห้องปฏิบัติการเพื่อกำหนดชนิดของเนื้อสัตว์
ความพยายามที่จะส่งต่อเนื้อสัตว์ประเภทหนึ่งไปเป็นเนื้อสัตว์อีกประเภทหนึ่งซึ่งมักจะมีคุณค่ามากกว่า เรียกว่า การปลอมแปลงสายพันธุ์ และอาจเกิดขึ้นได้ในตลาดใน เครือข่ายการค้าและสถาบันต่างๆ การจัดเลี้ยง- ดังนั้นสัตวแพทย์จึงต้องสามารถกำหนดชนิดของเนื้อสัตว์ได้ โดยทั่วไปแล้ว การปลอมแปลงสายพันธุ์จะใช้ซากสัตว์ที่มีขนาด รูปร่าง และลักษณะอื่นๆ คล้ายคลึงกัน ดังนั้นพวกเขามักจะพยายามส่งเนื้อม้าไปเป็นเนื้อวัว และในทางกลับกัน (ในบางประเทศที่เนื้อม้ามีมูลค่าสูงกว่า) ซากของสุนัขตัวใหญ่จะถูกส่งต่อเป็นซากแกะ แมวพยายามส่งผ่านเป็นกระต่ายและสัตว์นูเตรีย . เพื่อกำหนดชนิดของเนื้อสัตว์จะใช้วิธีการวัตถุประสงค์และแบบอัตนัย
วิธีการส่วนตัวในการกำหนดชนิดของเนื้อสัตว์วิธีการเชิงอัตวิสัย ได้แก่ โครงสร้าง ลักษณะทางสัณฐานวิทยาและประสาทสัมผัสของเนื้อสัตว์ เป็นต้น ดังนั้น ตัวอย่างเช่น เมื่อตรวจสอบด้วยสายตา ซากม้าจะมีคอที่ยาวกว่าและกลุ่มที่มีกล้ามเนื้อดี ในขณะที่ซากวัวจะมีกลุ่มที่สั้นกว่าและมีลักษณะแบนกว่า มักจะยื่นออกมาและ tuberosities ischial; เนื้อม้ามีสีเข้มกว่า แม้ว่าเนื้อวัวที่แก่หรือมีเลือดออกไม่ดีอาจมีสีแดงเข้ม แต่เนื้อม้าจะมองเห็นได้ชัดเจนกว่า มีขนาดใหญ่กว่า และมีเส้นใยกล้ามเนื้อที่ชัดเจนกว่าเมื่อเทียบกับเนื้อวัว
ตารางที่ 1
ลักษณะเฉพาะของโครงสร้างของกระดูกวัวและโครงกระดูกม้า
ไม่มีช่องปีกด้านหลัง มีแต่รอยบากปีกด้านหลัง |
มีด้านหน้าและด้านหลัง รูปีก |
|
ญาณวิทยา |
กระบวนการโอดอนตอยด์มีลักษณะกลวง มีรูปร่างเป็นรูปครึ่งดวงจันทร์ |
กระบวนการโอดอนตอยด์มีลักษณะนูนเป็นรูปสิ่ว |
แบนไม่มีสัน มีกระดูกข้อ 6 ข้อในแต่ละด้าน |
อัดจากด้านข้างได้ดี หงอนเด่นชัดและแอ่งข้อ 8 ข้อ |
|
sacrum แบนประกอบด้วยกระดูกสันหลังที่หลอมรวมกัน 5 ชิ้นกระบวนการ spinous จะแยกจากกัน |
sacrum มีลักษณะนูนออกมาหลอมรวมกันอย่างสมบูรณ์ประกอบด้วยกระดูกสันหลังที่หลอมรวมกันทั้งหมด 5 ชิ้น กระบวนการ spinous ถูกหลอมรวมกันเป็นสันที่ต่อเนื่องกัน |
|
กว้างแบน13คู่ |
หน้าตัดทรงถังแคบ 18 คู่ |
|
คอสั้น กระดูกสันหลังห้อยสูงเหนือคอ ปิดท้ายด้วยอะโครเมียน อัตราส่วนระหว่างส่วนพรีสปินัสและโพสออสสปินัสคือ 1:4 |
คอยาว กระดูกสันหลังต่ำลงมาทางคอของกระดูกสะบัก ไม่มีอะโครเมียน อัตราส่วนของส่วนพรีสปินัสและโพสออสสปินัสคือ 1:3 |
|
กระดูกต้นแขน |
มีรูปทรงบล็อกสองอัน กระบวนการและความหยาบ แทนที่จะเป็นโทรจันเตอร์ |
มีกระบวนการ trochlear สามกระบวนการและ trochanter ที่ได้รับการพัฒนาอย่างสูง |
รัศมีและท่อน |
รัศมีและท่อนยาวเท่ากัน |
รัศมีถึงกลางท่อน |
ต้นขา |
กระบวนการและการยื่นออกมานั้นเรียบขึ้น trochanter ที่มากขึ้นนั้นมีเสาหิน trochanter ที่น้อยกว่านั้นอยู่ในรูปแบบของตุ่มทื่อไม่มี trochanter ที่สาม |
โทรจันเตอร์ที่ใหญ่กว่าแบ่งออกเป็น สองส่วนที่กำหนดไว้อย่างชัดเจน trochanter น้อยกว่าและสาม |
กระดูกหน้าแข้ง |
กระดูกหน้าแข้งโค้งไปทางด้านตรงกลาง กระดูกหน้าแข้งอยู่ในรูปของกระบวนการพื้นฐาน |
กระดูกหน้าแข้งมีหน้าตัดเป็นรูปสามเหลี่ยม โดยมีกระดูกน่องอยู่ตรงกลาง |
กระดูกสันหลังส่วนอกและเอว |
กระบวนการ spinous ของกระดูกสันหลังนั้นแบนตั้งอยู่ในแนวตั้ง |
กระบวนการที่หมุนวนจะสิ้นสุดด้วยความหนารูปปุ่มและสัมผัสกัน |
วิธีการที่มีวัตถุประสงค์ในการกำหนดชนิดของเนื้อสัตว์ วิธีการกำหนดชนิดของเนื้อสัตว์
สิ่งที่สำคัญที่สุดคือวิธีการวัตถุประสงค์ที่ควรใช้ในการรวบรวม ข้อสรุปอย่างเป็นทางการ- วิธีการดังกล่าวได้แก่: ลักษณะทางกายวิภาคของโครงสร้างของกระดูกโครงร่าง จุดหลอมเหลวของไขมัน ปริมาณไกลโคเจนในเนื้อสัตว์ และปฏิกิริยาการตกตะกอนด้วยเซรั่มตกตะกอนเฉพาะสายพันธุ์
การกำหนดชนิดตามลักษณะทางกายวิภาคของโครงสร้างของกระดูกโครงร่างและ อวัยวะภายใน
คุณสามารถกำหนดชนิดของเนื้อสัตว์ได้จากกระดูกใด ๆ ของโครงกระดูกและแม้กระทั่งจากชิ้นส่วนของมัน ขั้นพื้นฐาน คุณสมบัติที่โดดเด่นกระดูกโครงกระดูกที่คล้ายกันในสัตว์ที่เปรียบเทียบแสดงไว้ในตาราง 12.
โต๊ะ. 2
คุณสมบัติเฉพาะของโครงสร้างของกระดูกโครงกระดูกของแมว กระต่าย และสัตว์นูเตรีย
อัตราส่วน |
อัตราส่วนความยาว |
รูปทรงเพชร |
|
ความยาวและความกว้าง |
และความกว้างของใบมีด |
พวกเรา อัตราส่วน |
|
สะบัก 1:3, คอ |
1:2, คอสั้น, |
ความยาวและความกว้าง |
|
กระดูกสันหลังยาวมาก |
กระดูกสันหลังสูง นำทาง- |
สะบัก 1:1 กระดูกสันหลัง |
|
ต่ำ, |
นั่งบนคอ |
ต่ำอะโครเมียน |
|
แตกแขนงออกไป |
กิ่งก้าน- |
เริ่มยาว- |
|
สองส่วน |
เป็นและเป็นผู้กำกับ |
จากตรงกลางที่สาม |
|
กระดูกต้นขา |
มีตัวใหญ่ |
มีหนึ่งความเจ็บปวด- |
มีขนาดใหญ่และ |
trochanter น้อยกว่าและสาม |
ไม้เสียบโชย |
ไม่มี trochanter ตัวที่สาม |
|
กระดูกหน้าแข้ง |
น่องเป็นพื้นฐาน |
กระดูกหน้าแข้งและกระดูกน่อง |
เครื่องมือจัดฟันกระดูกหน้าแข้งและฝีเย็บ |
อึดอัดและหลอมรวมกับความเจ็บปวด |
เชื่อมต่อกันด้วยข้อต่อที่สามารถเคลื่อนย้ายได้ |
เชื่อมต่อกันด้วยข้อต่อที่สามารถเคลื่อนย้ายได้ |
|
กระดูกหน้าแข้งสิ้นสุดในส่วนบนที่สาม |
พื้นผิวกระดูกหน้าแข้งจะหนากว่ากระดูกน่องมาก |
พื้นผิว กระดูกหน้าแข้งและกระดูกน่องมีความหนาเกือบเท่ากัน |
|
ยาวประกอบด้วยกระดูกสันหลังสี่ส่วนที่มีหนามสูงแยกจากกัน |
สั้นด้วยสาม ปริมาณตาต่ำ กระบวนการที่แตกต่างกัน ในตอนท้าย |
ประกอบด้วยกระดูกสันหลังขนาดใหญ่สี่ชิ้นที่มีกระบวนการ spinous แยกจากกัน |
|
หน่อ |
เมื่อพิจารณาเนื้อขนาดเล็ก วัวและสุนัขก็ควรคำนึงว่ากระดูกของวัวตัวเล็กมีรูปร่างเหมือนกระดูกวัว
จากลักษณะทางกายวิภาคของโครงสร้างของอวัยวะภายใน ทำให้สามารถระบุชนิดของเนื้อสัตว์และผลิตภัณฑ์ฆ่าสัตว์ได้อย่างแม่นยำ
ตับของวัวมีรูปร่างใหญ่เว้านูนมีสีน้ำตาลเข้มมีก้อนแสดงออกเล็กน้อยทางด้านขวาที่หน้าท้องจะมีรอยบากระหว่างถุงน้ำดีซึ่งมีถุงน้ำดีอยู่ ตับของม้ามีขนาดใหญ่และแบ่งออกเป็นสามกลีบอย่างชัดเจน กลีบด้านขวาแยกออกจากกลีบกลางด้วยรอยบากลึก และกลีบซ้ายจากกลีบกลางจะมีเอ็นกลมหายไป ตับของสุนัขมีขนาดใหญ่กว่าตับวัวตัวเล็กและแบ่งออกเป็นเจ็ดแฉก ปอดของวัวมีรูปแบบตาข่ายที่ชัดเจน แบ่งออกเป็นกลีบสมอง กลีบตรงกลาง และกลีบหางอย่างชัดเจน กลีบหน้าของกะโหลกศีรษะแบ่งออกเป็นสองซีก มีกลีบเสริมในปอดด้านขวา ในม้า ก้อนของปอดจะแสดงออกอย่างอ่อนแรง ขอบแหลมของปอดแต่ละอันมีรอยแยกระหว่างซี่โครงแบนซึ่งแยกกลีบหางออกจากกะโหลก ในสุนัข ไม่เหมือนกับแกะและแพะ มองไม่เห็นลวดลายตาข่ายบนปอด และกลีบของปอดจะถูกแยกออกจากกันด้วยรอยแยกระหว่างแถบลึกที่ขยายไปจนถึงหลอดลม
ไตของวัวประกอบด้วยกลีบ 16-18 กลีบ ม้ามีไตเดี่ยว ด้านซ้ายเป็นรูปสี่เหลี่ยมผืนผ้าหรือรูปถั่ว และด้านขวาเป็นรูปหัวใจ
ม้ามของวัวมีลักษณะแบน ยาว และมีขอบมน ม้ามีม้ามแบนรูปเคียว ขอบด้านหน้าโค้งและแหลม ขอบด้านหลังนูนและทื่อ ม้ามของสุนัขมีลักษณะแบนและมีรูปร่างเป็นสามเหลี่ยมไม่สม่ำเสมอ ปลายล่างกว้างขึ้น และปลายด้านบนแคบลง
หัวใจของวัวมียอดแหลมมากกว่าหัวใจของม้า นอกจากนี้ ผนังของช่องด้านซ้ายของม้ายังหนากว่าหัวใจของด้านขวาถึง 2.5 เท่า หัวใจของแกะและแพะมียอดแหลม ส่วนสุนัขมีหัวใจกลม
ลิ้นของวัวมีปลายหนาซึ่งแหลม ตรงกลางส่วนที่สามมีความหนาคล้ายลูกกลิ้ง และมีฝาปิดกล่องเสียงรูปวงรี ลิ้นของม้ายาวและแบนขึ้น ปลายโค้งมน และฝาปิดกล่องเสียงโค้งมน สุนัขต่างจากวัวตัวเล็กตรงที่มีลิ้นแบนกว้างและมีขอบแหลม มีร่องตรงกลางบนพื้นผิวด้านบน
การหาจุดหลอมเหลวของไขมันจุดหลอมเหลวของไขมันเป็นเรื่องเฉพาะสำหรับสัตว์ ประเภทต่างๆจึงเป็นตัวบ่งชี้วัตถุประสงค์ในการกำหนดชนิดของเนื้อสัตว์ นอกจากนี้ตัวบ่งชี้ในสายพันธุ์สัตว์ที่เปรียบเทียบนี้มีความแตกต่างกัน 1.5-2 เท่าซึ่งทำให้การวินิจฉัยง่ายขึ้นอย่างมาก
การตั้งค่าปฏิกิริยา ไขมันที่อยู่ระหว่างการศึกษาจะถูกละลายและรวบรวมเป็นเส้นเลือดฝอยแก้วใสที่มีเส้นผ่านศูนย์กลาง 1.5 มม. ความสูงของคอลัมน์ไขมันควรอยู่ที่ 5-7 มม. วางเส้นเลือดฝอยที่มีไขมันไว้ในตู้เย็นประมาณ 1-2 ชั่วโมง หลังจากเย็นตัวลงแล้ว เส้นเลือดฝอยที่มีไขมันจะถูกยึดไว้กับเทอร์โมมิเตอร์โดยใช้แถบยางยืดเพื่อให้คอลัมน์ไขมันอยู่ในระนาบเดียวกันกับหัวของเทอร์โมมิเตอร์ หลังจากนั้นเทอร์โมมิเตอร์พร้อมกับเส้นเลือดฝอยจะถูกยึดไว้บนขาตั้งกล้องแล้วหย่อนลงในบีกเกอร์ใสที่เต็มไปด้วยน้ำแล้ววางบนเตาไฟฟ้าเพื่อให้ส่วนบนของเส้นเลือดฝอยอยู่เหนือผิวน้ำ (ดูรูปที่ I) . จากนั้นจึงเริ่มให้น้ำร้อนโดยใช้แท่งแก้วคนให้เข้ากัน การให้ความร้อนจะดำเนินต่อไปจนกว่าคอลัมน์ไขมันจะโปร่งใส และภายใต้แรงดันน้ำ จะเริ่มยกตัวขึ้นในเส้นเลือดฝอย ขณะนี้มีการอ่านค่าเทอร์โมมิเตอร์แล้ว ทำการวัดซ้ำห้าครั้งและพบค่าเฉลี่ยเลขคณิต ผลลัพธ์ที่ได้ถือเป็นจุดหลอมเหลวของไขมันที่กำลังศึกษา ตารางแสดงจุดหลอมเหลวของไขมันในสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมและนกบางชนิด 3.
การหาปริมาณไกลโคเจนในกล้ามเนื้อ
ในเนื้อสัตว์ที่เปรียบเทียบปริมาณไกลโคเจนจะแตกต่างกัน 2-3 เท่า ตัวอย่างเช่น ปริมาณไกลโคเจนในเนื้อม้า สุนัข และแมวสูงกว่าเนื้อวัว โคตัวเล็ก และกระต่ายอย่างมีนัยสำคัญ ซึ่งทำให้สามารถใช้ปฏิกิริยาเชิงคุณภาพกับไกลโคเจนเพื่อกำหนดชนิดของเนื้อสัตว์ได้ อย่างไรก็ตาม ควรจำไว้ว่าปริมาณไกลโคเจนไม่คงที่และขึ้นอยู่กับสภาพของสัตว์ ณ เวลาที่ฆ่า สภาพการเจริญเติบโต และระยะเวลาในการเก็บรักษาเนื้อสัตว์
การตั้งค่าปฏิกิริยา
นำตัวอย่างเนื้อสัตว์ที่ทดสอบมาบดเป็นชิ้น เทน้ำกลั่นในอัตราส่วน 1:4 แล้วต้มในขวดเป็นเวลา 30 นาที น้ำซุปจะถูกกรองผ่านตัวกรองกระดาษและทำให้เย็นลง นำน้ำซุป 5 มล. ลงในหลอดทดลองและเติมสารละลายของ Lugol 5-10 หยด
การบัญชีสำหรับปฏิกิริยา
หากปฏิกิริยาเป็นบวก (โดยทั่วไปสำหรับม้า สุนัข และแมว) สารในหลอดทดลองจะเปลี่ยนเป็นสีแดงเชอร์รี่หรือม่วงไลแลค
ในกรณีที่เกิดปฏิกิริยาที่น่าสงสัย (เกิดขึ้นในแมว) สีจะเป็นสีส้ม
หากปฏิกิริยาเป็นลบ (โดยทั่วไปสำหรับวัว แกะ และแพะ) สิ่งที่บรรจุอยู่ในหลอดจะเป็นสีเหลือง
ปฏิกิริยาการตกตะกอนกับซีรั่มเฉพาะสายพันธุ์
การทำปฏิกิริยากับซีรั่มตกตะกอนเฉพาะสายพันธุ์เป็นหนึ่งในวิธีการที่แม่นยำที่สุดในการระบุชนิดของเนื้อสัตว์ เมื่อใช้ปฏิกิริยานี้ คุณสามารถตรวจสอบไม่เพียงแต่เนื้อสัตว์ แต่ยังรวมถึงเนื้อสับ หรือแม้แต่ผลิตภัณฑ์กึ่งสำเร็จรูป และพิจารณาการเติมเนื้อสัตว์จากสัตว์ประเภทอื่นลงในผลิตภัณฑ์เหล่านี้
การตั้งค่าปฏิกิริยา 4 ชั่วโมงของเนื้อสัตว์ เนื้อสับ และผลิตภัณฑ์กึ่งสำเร็จรูปภายใต้การศึกษา เป็นการเตรียมสารสกัด ในการทำเช่นนี้ ตัวอย่างของผลิตภัณฑ์บดเป็นเนื้อสับและเติมสารละลายโซเดียมคลอไรด์ 0.9% ในอัตราส่วน 1:1 แล้วสกัดเป็นเวลา 3 ชั่วโมง หลังจากนั้นจึงกรองผ่านตัวกรองกระดาษ (สารสกัดควรมีความโปร่งใส) .
จุดหลอมเหลวของไขมันสัตว์ชนิดต่างๆ
อัตราส่วนที่เหมาะสมที่สุดสำหรับปฏิกิริยาคือโปรตีน 1:1000 ที่จะสกัด
เพื่อตั้งค่าปฏิกิริยา ให้วางท่อ Ulengut สามแถวไว้บนขาตั้ง ใช้ปิเปต นำสารสกัดที่อยู่ระหว่างการศึกษา 0.9 มล. ลงในหลอดทดลองของแถวแรก, สารละลายโซเดียมคลอไรด์ 0.9% 0.9 มล. ลงในหลอดทดลองของแถวที่สอง และซีรั่มมาตรฐาน 0.9 มล. ลงในหลอดทดลองของ แถวที่สาม หลากหลายชนิดสัตว์ที่มีการเจือจางเช่นเดียวกับซีรั่มที่ตกตะกอนในการวินิจฉัย จากนั้น เมื่อใช้ปิเปตปาสเตอร์ เซรั่มวินิจฉัย 0.1 มิลลิลิตรที่ตกตะกอนด้วยโปรตีนของสัตว์แต่ละสายพันธุ์จะถูกเติมลงในหลอดทดลองทั้งสามหลอด
การบัญชีสำหรับปฏิกิริยา
ปฏิกิริยาจะถูกบันทึกหลังจากผ่านไป 10 นาที ปฏิกิริยานี้ถือว่าเชื่อถือได้หากสารในหลอดทดลองที่มีน้ำเกลือยังคงโปร่งใส และมีวงแหวนตกตะกอนก่อตัวในหลอดทดลองที่มีซีรั่มมาตรฐาน
หากมีการสร้างวงแหวนเดียวกันในหลอดทดลองโดยมีสารสกัดอยู่ระหว่างการศึกษา ปฏิกิริยาจะถือว่าเป็นบวกและกำหนดประเภทของเนื้อสัตว์ หากสารในหลอดนี้ยังคงโปร่งใส ปฏิกิริยาจะถือว่าเป็นลบ และการศึกษาต่อกับซีรั่มของสัตว์สายพันธุ์อื่น
/ ทิชิโนวา แอล.เอ. - เมเตอร์. II รัสเซียทั้งหมด สภานิติเวชแพทย์: บทคัดย่อรายงาน - อีร์คุตสค์-ม., 2530 — หน้า 264-266.
การกำหนดชนิดของวัตถุที่มีต้นกำเนิดทางชีวภาพ
คำอธิบายบรรณานุกรม:
การกำหนดชนิดของวัตถุที่มีต้นกำเนิดทางชีวภาพ / Tishinova L.A. //เมเตอร์. II รัสเซียทั้งหมด สภานิติเวชแพทย์: บทคัดย่อรายงาน - อีร์คุตสค์-ม., 2530. - หน้า 264-266.
รหัสเอชทีเอ็ม:
/ ทิชิโนวา แอล.เอ. //เมเตอร์. II รัสเซียทั้งหมด สภานิติเวชแพทย์: บทคัดย่อรายงาน - อีร์คุตสค์-ม., 2530. - หน้า 264-266.
รหัสฝังสำหรับฟอรั่ม:
การกำหนดชนิดของวัตถุที่มีต้นกำเนิดทางชีวภาพ / Tishinova L.A. //เมเตอร์. II รัสเซียทั้งหมด สภานิติเวชแพทย์: บทคัดย่อรายงาน - อีร์คุตสค์-ม., 2530. - หน้า 264-266.
วิกิ:
/ ทิชิโนวา แอล.เอ. //เมเตอร์. II รัสเซียทั้งหมด สภานิติเวชแพทย์: บทคัดย่อรายงาน - อีร์คุตสค์-ม., 2530. - หน้า 264-266.
เพื่อที่จะกำหนดลักษณะเฉพาะของร่องรอยของเลือดและสารคัดหลั่ง การทดสอบทางภูมิคุ้มกัน ปฏิกิริยาไพรมิงในการดัดแปลงต่างๆ และปฏิกิริยาอิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์จึงถูกนำมาใช้ในการปฏิบัติงานทางนิติเวช การใช้ปฏิกิริยาอิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์จะกำหนดที่มาของสปีชีส์ของแต่ละเซลล์ด้วย อย่างไรก็ตาม อาจมีสถานการณ์ที่การทดสอบเหล่านี้ไม่ได้ผล สิ่งนี้จะสังเกตได้ในกรณีที่วัตถุในการตรวจสอบสัมผัสกับปัจจัยที่ไม่เอื้ออำนวย และดังนั้นจึงมีการทำลายโปรตีนเฉพาะสายพันธุ์หรือการเปลี่ยนแปลงที่ทำให้ไม่สามารถตรวจพบได้
จากสิ่งที่กล่าวมาข้างต้น มีความจำเป็นที่จะต้องพัฒนาวิธีการเพิ่มเติมในการสร้างเอกลักษณ์ของสายพันธุ์ของวัตถุที่มีต้นกำเนิดทางชีวภาพ
สิ่งที่น่าสนใจเป็นพิเศษในด้านนี้คือแอนติเจน H ซึ่งตัดสินโดยวรรณกรรม (M. Kriere, 1956; W. Reimann, S. Popvassileff, 1960; A.K. Tumanov, 1975) มีอยู่ในเลือดมนุษย์ โดยไม่คำนึงถึงความผูกพันของกลุ่ม ระบบ ABO เช่นเดียวกับประเภทของการขับถ่ายและไม่มีในสัตว์ เป็นที่ทราบกันว่าแอนติเจนนี้ซึ่งเป็นโพลีแซ็กคาไรด์มีความต้านทานมากกว่าเมื่อเปรียบเทียบกับแอนติเจนของโปรตีน (G.A. Sergeeva, Yu.D. Alekseev, 1981; E.I. Koroleva, 1983)
วัตถุประสงค์ของการศึกษาของเราคือเพื่อพิจารณาความสำคัญของแอนติเจน H ของระบบ ABO ในฐานะการทดสอบเฉพาะสปีชีส์เพื่อระบุความเป็นเจ้าของของวัตถุทางชีวภาพที่ระบุในหลักฐานทางกายภาพของบุคคล
การทดลองเกี่ยวข้องกับการตรวจหาแอนติเจน H ในของเหลว เลือดแห้ง และน้ำลาย เซลล์เยื่อบุแก้มของผู้บริจาคชายและหญิงจำนวน 132 ราย อายุระหว่าง 26 ถึง 56 ปี ของทุกกลุ่มตามระบบ ABO โดยในจำนวนนี้ 16 รายเป็นผู้ไม่ขับถ่ายคุณสมบัติกลุ่ม ศึกษาเลือดของเหลวและแห้งของวัว 32 ตัว แกะ 26 ตัว สุกร 24 ตัว สุนัข 26 ตัว แมว 7 ตัว ม้า 6 ตัว และเซลล์เยื่อบุกระพุ้งแก้มของสุนัข 8 ตัว และแมว 4 ตัว สำหรับเลือดของเหลว ปฏิกิริยาการเกาะติดกันถูกใช้บนเครื่องบินและในหลอดทดลองโดยใช้ซีรั่มต่อต้าน H ของเฮเทอโรอิมมูน เช่นเดียวกับเลคติน (สารสกัดจากผลไม้ Elderberry เมล็ดไม้กวาดนั่งและถั่ว Vaterer) สำหรับเลือดแห้ง - ปฏิกิริยาการดูดซึมของ agglutinins ในการปรับเปลี่ยนเชิงปริมาณและการชะล้างการดูดซึมด้วยรีเอเจนต์เดียวกัน น้ำลาย - ปฏิกิริยาการดูดซึมของ agglutinins ในการปรับเปลี่ยนเชิงปริมาณ , เซลล์ - ปฏิกิริยาอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์ .
ในผู้บริจาคทั้งหมด 132 ราย ตรวจพบแอนติเจน H โดยไม่คำนึงถึงความผูกพันของกลุ่ม มันถูกเปิดเผยอย่างชัดเจนเท่าเทียมกันจากปฏิกิริยาทั้งหมดในทั้งตัวขับถ่ายและตัวไม่ขับถ่าย แต่อย่างหลังเมื่อใช้ RIF จะสังเกตเห็นการลดลงของจำนวนเซลล์ที่เรืองแสงและความสว่างของการเรืองแสง
ในสัตว์ไม่มีการศึกษาใดเลย (ใช้เลคติน เซรั่มต่อต้านแกะเรืองแสง และเซรั่มต่อต้านเอชภูมิคุ้มกันแบบเฮเทอโรอิมมูนที่กล่าวมาข้างต้นในปฏิกิริยา) ไม่มีการสร้างแอนติเจน H
เอกสารที่บันทึกไว้และข้อมูลของเราเองเกี่ยวกับความจำเพาะของสปีชีส์ของแอนติเจน H ทำให้เราใช้การทดสอบนี้เพื่อระบุชนิดของวัตถุที่มีต้นกำเนิดทางชีวภาพในการสังเกต 7 ครั้งจากการปฏิบัติ หนึ่งในนั้นคือการตรวจสอบเชิงกรานในเซลล์ผิวหนังเยื่อบุผิวที่แยกได้สี่เซลล์ (วัตถุถูกนำออกจากเสื้อผ้า, หัวเข็มขัด, รถแทรคเตอร์, ในกองไฟ) ในสอง - ร่องรอยของเลือดบนผิวหนังและประแจที่ปรับได้ ไม่สามารถระบุเอกลักษณ์ของสปีชีส์ของวัตถุเหล่านี้โดยปฏิกิริยาการตกตะกอน อย่างไรก็ตาม แอนติเจน H ถูกระบุโดยปฏิกิริยาอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์และปฏิกิริยาการเกาะติดกันแบบผสม
ดังนั้น การสังเกตเชิงทดลองและการปฏิบัติของเราบ่งชี้ว่าตรวจไม่พบแอนติเจน H ในสัตว์ แต่ตรวจพบได้อย่างชัดเจนเท่ากันในเลือดและเซลล์เนื้อเยื่อของทุกคน โดยไม่คำนึงถึงการสังกัดกลุ่มตามระบบ ABO และประเภทของการขับถ่าย ดังนั้นข้อเท็จจริงของการมีอยู่ของแอนติเจนนี้คือการทดสอบเฉพาะสปีชีส์เพิ่มเติมที่ช่วยให้เราสามารถตัดสินได้ว่าวัตถุนั้นเป็นของบุคคลหรือไม่ สามารถใช้ H แอนติเจนเพื่อระบุชนิดของสารคัดหลั่ง รวมถึงเลือด เนื้อเยื่อของร่างกาย และเซลล์ที่แยกได้
คำนิยาม สายพันธุ์สังกัดสายเลือด - แก้ไขปัญหาความเป็นเจ้าของ (สัตว์หรือมนุษย์) การกำหนดประเภทของเลือดคือ ข้อกำหนดเบื้องต้นเพื่อการวิจัยครั้งต่อไปเพื่อกำหนดหมู่เลือดและความเป็นไปได้ของแหล่งกำเนิดเลือดจากบุคคลใดบุคคลหนึ่ง การศึกษาดังกล่าวยังช่วยให้สามารถตรวจสอบแหล่งที่มาของเลือดของผู้ต้องสงสัยบนเสื้อผ้าและอาวุธอาชญากรรมจากสัตว์บางชนิดได้ การระบุข้อเท็จจริงเกี่ยวกับต้นกำเนิดของเลือดจากสัตว์หรือนกบางชนิดอาจเป็นการศึกษาอิสระในกรณีของการลักลอบล่าสัตว์ อุบัติเหตุทางเครื่องบิน และภายใต้สถานการณ์อื่นๆ
ข้าว. 93. ปฏิกิริยาชิสโตวิช.
ซ้าย - บวก; ทางด้านขวา - ลบ
ชนิดของเลือดถูกกำหนดโดยใช้ปฏิกิริยาการตกตะกอน ปฏิกิริยานี้เกี่ยวข้องกับ เครื่องดูดควันจากคราบ (โปรตีนในเลือด-แอนติเจน) และการตกตะกอน เซรั่ม(แอนติบอดี) ที่สามารถทำปฏิกิริยากับโปรตีนของคนหรือสัตว์เฉพาะเท่านั้น - ม้า, สุนัข, หมู, วัว ฯลฯ ปฏิสัมพันธ์เฉพาะของแอนติเจนและแอนติบอดีของสายพันธุ์นั้นแสดงออกมาโดยการก่อตัวของตะกอน (ตกตะกอน) ผู้เชี่ยวชาญจะพิจารณาว่าเซรั่มตัวใดที่ทำให้เกิดปฏิกิริยาจะเกิดการตกตะกอน และจากสิ่งนี้จะเป็นตัวกำหนดประเภทของเลือดในคราบ สำหรับการควบคุม การทดลองจะดำเนินการโดยใช้สารสกัดจากวัตถุที่อยู่นอกคราบเลือดด้วย (รูปที่ 93)
ปฏิกิริยาการตกตะกอนมีความอ่อนไหวมาก ผลลัพธ์ขึ้นอยู่กับสถานะของโปรตีนในเลือดเป็นส่วนใหญ่ และความสามารถในการละลายของโปรตีนนั้นเป็นหลัก ดังนั้นการจัดการหลักฐานทางวัตถุที่ไม่เหมาะสม โดยเฉพาะอย่างยิ่งการทำให้แห้งที่อุณหภูมิสูง อาจนำไปสู่การเปลี่ยนแปลงของโปรตีนในเลือดไปสู่สถานะที่ไม่ละลายน้ำ ซึ่งจะช่วยป้องกันการสร้างประเภทของหลักฐานเหล่านั้น การขนส่งเสื้อผ้าเปียกที่มีคราบเลือดจะทำให้เสื้อผ้าเน่าเปื่อยและสูญเสียโปรตีน ซึ่งทำให้ไม่สามารถระบุประเภทของเลือดได้
ข้าว. 94. ปฏิกิริยาการตกตะกอนในวุ้น (คำอธิบายในข้อความ)
ปฏิกิริยาโดยทั่วไปการตกตะกอนจะดำเนินการในหลอดทดลองที่มีปลายบาง ขั้นแรก ให้ใส่สารสกัดจากคราบที่กำลังศึกษา จากนั้นหยดเซรั่มที่ตกตะกอนลงไปที่ด้านล่างของหลอดด้วยปิเปต หากปฏิกิริยาเป็นบวก จะเกิดการตกตะกอนที่รอยต่อระหว่างซีรั่มและสารสกัดในรูปของความขุ่นรูปแผ่นดิสก์ การไม่มีตะกอนในหลอดทดลองควบคุมด้วยสารสกัดของวัตถุพาหะ ทำให้ในกรณีเช่นนี้สามารถสรุปเกี่ยวกับเลือดบางประเภทในคราบทดสอบได้ ผลการตกตะกอนที่เป็นลบกับซีรั่มที่ตกตะกอนทั้งหมดอาจเกิดจากการทำลายหรือละลายไม่ได้ของโปรตีนในเลือด ปริมาณเลือดไม่เพียงพอ หรือการมีอยู่ของเลือดจากสัตว์อื่น ในกรณีเช่นนี้ พวกเขาหันไปใช้ความเข้มข้นของสารสกัดและใช้วิธีการที่ละเอียดอ่อนมากขึ้นในการพิจารณา สายพันธุ์อุปกรณ์เสริมของเลือด - ปฏิกิริยาการตกตะกอนบนกระดาษโครมาโตกราฟีแบบพิเศษ ปฏิกิริยาการตกตะกอนในวุ้น วิธีการตกตะกอนด้วยไฟฟ้า ฯลฯ ปฏิกิริยาการตกตะกอนในวุ้นยังใช้ในกรณีที่ความขุ่นของสารสกัดขัดขวางการวิจัยในตัวกลางที่เป็นของเหลว ชั้นของวุ้นที่หลอมละลายถูกเทลงบนกระจกหลังจากที่แข็งตัวแล้วจะมีการกดทับในนั้นซึ่งบางส่วนจะวางสารสกัดจากคราบและในบางส่วน - เซรั่มที่ตกตะกอน พวกมันแพร่กระจายเข้าไปในวุ้นและเมื่อสารสกัด (แอนติเจน) และเซรั่มที่ตกตะกอนมาพบกัน หากมีความคล้ายคลึงกัน การตกตะกอนจะเกิดขึ้นในรูปแบบของแถบสีขาว ถ้า เครื่องดูดควันและ เซรั่มต่างกัน ไม่มีการตกตะกอน (รูปที่ 94)
เพื่อแยกความแตกต่างระหว่างเลือดมนุษย์และสัตว์ (ขึ้นอยู่กับเนื้อหาขององค์ประกอบอนินทรีย์จำนวนหนึ่ง) สามารถใช้วิธีการวิเคราะห์สเปกตรัมการปล่อยก๊าซได้ ในปัจจุบัน เพื่อเพิ่มความไวและความละเอียดของปฏิกิริยาการตกตะกอน ตัวบ่งชี้เลเซอร์จึงถูกใช้เป็นตัวบันทึกการก่อตัวของตะกอน วิธีนี้ช่วยให้คุณระบุประเภทของเลือดในคราบผสมและคราบที่ละลายยาก ในคราบเลือดบนวัตถุพาหะที่ปนเปื้อน
ในปัจจุบัน เพื่อระบุชนิดของเลือด แนะนำให้ใช้วิธีอิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์ด้วย โดยเซรั่มที่เกาะติดกันจะรวมกับฟลูออโรโครม ในกรณีที่ผลเป็นบวก เมื่อตรวจสอบวัตถุในรังสีอัลตราไวโอเลต จะมองเห็นแสงเรืองแสงเป็นสีที่สอดคล้องกับฟลูออโรโครมซึ่งซีรั่มเคยผสมไว้ก่อนหน้านี้
การกำหนดประเภทของเลือดเป็นวิธีการแก้ปัญหาความเป็นเจ้าของ (สัตว์หรือมนุษย์) การกำหนดประเภทของเลือดเป็นข้อกำหนดเบื้องต้นสำหรับการวิจัยในภายหลังเพื่อระบุกลุ่มเลือดและความเป็นไปได้ของแหล่งกำเนิดเลือดจากบุคคลใดบุคคลหนึ่ง การศึกษาดังกล่าวยังช่วยให้สามารถตรวจสอบแหล่งที่มาของเลือดของผู้ต้องสงสัยบนเสื้อผ้าและอาวุธอาชญากรรมจากสัตว์บางชนิดได้ การระบุข้อเท็จจริงเกี่ยวกับต้นกำเนิดของเลือดจากสัตว์หรือนกบางชนิดอาจเป็นการศึกษาอิสระในกรณีของการลักลอบล่าสัตว์ อุบัติเหตุทางเครื่องบิน และภายใต้สถานการณ์อื่นๆ
ข้าว. 93. ปฏิกิริยาของชิสโตวิช
ซ้าย - บวก; ทางด้านขวา - ลบ
ชนิดของเลือดถูกกำหนดโดยใช้ปฏิกิริยาการตกตะกอน ปฏิกิริยานี้เกี่ยวข้องกับสารสกัดจากคราบ (โปรตีนในเลือด - แอนติเจน) และเซรั่มที่ตกตะกอน (แอนติบอดี) ที่สามารถทำปฏิกิริยาได้เฉพาะกับโปรตีนของคนหรือสัตว์เฉพาะ เช่น ม้า สุนัข หมู วัว เป็นต้น ปฏิกิริยาเฉพาะของ แอนติเจนและแอนติบอดีของสายพันธุ์นั้นแสดงออกมาโดยการก่อตัวของตะกอน (ตกตะกอน) ผู้เชี่ยวชาญจะพิจารณาว่าเซรั่มตัวใดที่ทำให้เกิดปฏิกิริยาจะเกิดการตกตะกอน และจากสิ่งนี้จะเป็นตัวกำหนดประเภทของเลือดในคราบ สำหรับการควบคุม การทดลองจะดำเนินการโดยใช้สารสกัดจากวัตถุที่อยู่นอกคราบเลือดด้วย (รูปที่ 93)
ปฏิกิริยาการตกตะกอนมีความอ่อนไหวมาก ผลลัพธ์ขึ้นอยู่กับสถานะของโปรตีนในเลือดเป็นส่วนใหญ่ และความสามารถในการละลายของโปรตีนนั้นเป็นหลัก ดังนั้นการจัดการหลักฐานทางวัตถุที่ไม่เหมาะสม โดยเฉพาะอย่างยิ่งการทำให้แห้งที่อุณหภูมิสูง อาจนำไปสู่การเปลี่ยนแปลงของโปรตีนในเลือดไปสู่สถานะที่ไม่ละลายน้ำ ซึ่งจะช่วยป้องกันการสร้างประเภทของหลักฐานเหล่านั้น การขนส่งเสื้อผ้าเปียกที่มีคราบเลือดจะทำให้เสื้อผ้าเน่าเปื่อยและสูญเสียโปรตีน ซึ่งทำให้ไม่สามารถระบุประเภทของเลือดได้
ปฏิกิริยาการตกตะกอนมักเกิดขึ้นในหลอดทดลองที่มีปลายบาง ขั้นแรก ให้ใส่สารสกัดจากคราบที่กำลังศึกษา จากนั้นหยดเซรั่มที่ตกตะกอนลงไปที่ด้านล่างของหลอดด้วยปิเปต หากปฏิกิริยาเป็นบวก จะเกิดการตกตะกอนที่รอยต่อระหว่างซีรั่มและสารสกัดในรูปของความขุ่นรูปแผ่นดิสก์ การไม่มีตะกอนในหลอดทดลองควบคุมด้วยสารสกัดของวัตถุพาหะ ทำให้ในกรณีเช่นนี้สามารถสรุปเกี่ยวกับเลือดบางประเภทในคราบทดสอบได้ ผลการตกตะกอนที่เป็นลบกับซีรั่มที่ตกตะกอนทั้งหมดอาจเกิดจากการทำลายหรือละลายไม่ได้ของโปรตีนในเลือด ปริมาณเลือดไม่เพียงพอ หรือการมีอยู่ของเลือดจากสัตว์อื่น ในกรณีเช่นนี้ พวกเขาหันไปใช้ความเข้มข้นของสารสกัดและใช้วิธีการที่ละเอียดอ่อนมากขึ้นในการกำหนดประเภทของเลือด - ปฏิกิริยาการตกตะกอนบนกระดาษพิเศษสำหรับเลือด ปฏิกิริยาการตกตะกอนในวุ้น วิธีการตกตะกอนด้วยไฟฟ้า ฯลฯ ปฏิกิริยาการตกตะกอนในวุ้นก็ใช้ในกรณีเช่นกัน โดยที่ความขุ่นของสารสกัดขัดขวางการวิจัยในสภาพแวดล้อมที่เป็นของเหลว ชั้นของวุ้นที่หลอมละลายถูกเทลงบนกระจกหลังจากที่แข็งตัวแล้วจะมีการกดทับในนั้นซึ่งบางส่วนจะวางสารสกัดจากคราบและในบางส่วน - เซรั่มที่ตกตะกอน พวกมันแพร่กระจายเข้าไปในวุ้นและเมื่อสารสกัด (แอนติเจน) และเซรั่มที่ตกตะกอนมาพบกัน หากมีความคล้ายคลึงกัน การตกตะกอนจะเกิดขึ้นในรูปแบบของแถบสีขาว หากสารสกัดและซีรั่มต่างกัน จะไม่เกิดการตกตะกอน (รูปที่ 94)
ข้าว. 94. ปฏิกิริยาการตกตะกอนในวุ้น (คำอธิบายในข้อความ)
เพื่อแยกความแตกต่างระหว่างเลือดมนุษย์และสัตว์ (ขึ้นอยู่กับเนื้อหาขององค์ประกอบอนินทรีย์จำนวนหนึ่ง) สามารถใช้วิธีการวิเคราะห์สเปกตรัมการปล่อยก๊าซได้ ในปัจจุบัน เพื่อเพิ่มความไวและความละเอียดของปฏิกิริยาการตกตะกอน ตัวบ่งชี้เลเซอร์จึงถูกใช้เป็นตัวบันทึกการก่อตัวของตะกอน วิธีนี้ช่วยให้คุณระบุประเภทของเลือดในคราบผสมและคราบที่ละลายยาก ในคราบเลือดบนวัตถุพาหะที่ปนเปื้อน
ในปัจจุบัน เพื่อระบุชนิดของเลือด แนะนำให้ใช้วิธีอิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์ด้วย โดยเซรั่มที่เกาะติดกันจะรวมกับฟลูออโรโครม ในกรณีที่ผลเป็นบวก เมื่อตรวจสอบวัตถุในรังสีอัลตราไวโอเลต จะมองเห็นแสงเรืองแสงเป็นสีที่สอดคล้องกับฟลูออโรโครมซึ่งซีรั่มเคยผสมไว้ก่อนหน้านี้
ประเภทของเนื้อสัตว์ในประเทศ สัตว์ป่า และสัตว์ปีก ได้รับการจัดตั้งขึ้นเพื่อแก้ไขปัญหาที่เกี่ยวข้องกับการพิจารณาคดี
การตรวจสัตวแพทย์กรณีใช้เนื้อสัตว์แทนกัน (ปลอมแปลง) ลักลอบล่าสัตว์
มีวิธีการโดยประมาณและเชื่อถือได้ (แม่นยำ) ในการกำหนดชนิดของเนื้อสัตว์
ค่าโดยประมาณคือ: จุดหลอมเหลวและจุดเยือกแข็งของไขมันของเนื้อสัตว์ที่ศึกษา, จำนวนไอโอดีน, ความหนาแน่น, ดัชนีการหักเหของแสง; การปรากฏตัว (ปฏิกิริยาเชิงคุณภาพ) และความเข้มข้นของไกลโคเจนในเนื้อเยื่อกล้ามเนื้อ, ตัวชี้วัดทางประสาทสัมผัสของไขมันและเนื้อสัตว์:
วิธีการที่เชื่อถือได้ (แม่นยำ) ในการกำหนดชนิดของเนื้อสัตว์คือการกำหนดสูตรของปฏิกิริยาการตกตะกอน (เมื่อมีเซรั่มภูมิต้านทานเกิน) และลักษณะทางกายวิภาค! โครงสร้างของกระดูกโครงกระดูก (ถ้ามี)
ตารางแสดงตัวชี้วัดทางเคมีกายภาพบางประการของไขมันที่บริโภคได้ประเภทต่างๆ ไว้ในตาราง 13.
การหาจุดหลอมเหลวของไขมัน ไขมันที่ละลายและกรองแล้วของตัวอย่างทดสอบจะถูกรวบรวมไว้ในเส้นเลือดฝอยแก้วที่สะอาดและแห้งซึ่งมีเส้นผ่านศูนย์กลาง 1.4-1.5 มม. ความยาวของคอลัมน์ไขมันในเส้นเลือดฝอยควรอยู่ที่ประมาณ 20 มม. เพื่อให้ไขมันแข็งตัวโดยสมบูรณ์ เส้นเลือดฝอยจะถูกเก็บไว้ในตู้เย็นในครัวเรือนหรือบนน้ำแข็งเป็นเวลา 1-2 ชั่วโมง หลังจากเย็นตัวลงแล้ว ปลายท่อเส้นเลือดฝอยที่เต็มไปด้วยไขมันจะถูกตัดออก (หักออก) เหลือคอลัมน์ไขมันไว้ยาวอย่างน้อย 5 มม. เทอร์โมมิเตอร์เคมียึดเส้นเลือดฝอยด้วยวงแหวนยาง โดยให้ด้านที่มีไขมันหงายขึ้นและด้านที่ไม่มีไขมันคว่ำหน้าลง วางเทอร์โมมิเตอร์ที่มีเส้นเลือดฝอยไว้ในหลอดทดลอง (เส้นผ่านศูนย์กลาง 20-25 มม.) และยึดไว้โดยใช้จุกที่มีรูสำหรับเทอร์โมมิเตอร์ เทอร์โมมิเตอร์ไม่ควรสัมผัสกับผนังของหลอดทดลอง หลอดทดลองติดตั้งอยู่บนขาตั้ง วางลงในแก้วน้ำ และระดับน้ำในแก้วควรสูงกว่าปลายด้านบนของเส้นเลือดฝอย น้ำในแก้วจะถูกทำให้ร้อนอย่างช้าๆ บนพื้นหลังสีเข้ม ผ่านแว่นขยาย สังเกตการอ่านค่าเทอร์โมมิเตอร์และสภาพของไขมันในเส้นเลือดฝอย เทอร์โมมิเตอร์ที่อ่านค่าในขณะที่ไขมันเริ่มไหลลงมาตามเส้นเลือดฝอยและช่องว่างในส่วนบนจะถูกบันทึกว่าเป็นอุณหภูมิหลอมละลายของไขมัน การหาค่าจะดำเนินการสองครั้งและผลลัพธ์ถือเป็นค่าเฉลี่ยเลขคณิตของการทดสอบทั้งสองครั้ง โดยค่าเหล่านี้ไม่ควรต่างกันเกิน 0.5°C
การหาจุดเยือกแข็งของไขมัน จุดไหลคืออุณหภูมิสูงสุดที่คงที่ในช่วงเวลาสั้นๆ ในระหว่างการเปลี่ยนไขมันจากของเหลวเป็นสถานะของแข็ง จุดไหลขึ้นอยู่กับ องค์ประกอบทางเคมีไขมันและไม่เพียงแต่ใช้เพื่อประเมินระดับความบริสุทธิ์ของไขมันเท่านั้น แต่ยังใช้เพื่อระบุชนิดโดยประมาณอีกด้วย ไขมันที่จะทดสอบจะถูกละลายในอ่างน้ำ กรอง ทำให้แห้ง และเทลงในหลอดทดลอง อุณหภูมิของไขมันควรสูงกว่าจุดเยือกแข็งที่คาดไว้ 12-15°C ปิดหลอดทดลองด้วยจุกซึ่งมีเทอร์โมมิเตอร์ที่มีสเกลแบ่งเป็นห้าหรือสิบองศาเสียบอยู่ เทอร์โมมิเตอร์มีความแข็งแกร่งขึ้นเพื่อให้ก้อนปรอทอยู่ตรงกลางชั้นไขมัน และไม่สัมผัสกับผนังและก้นหลอดทดลอง
หลอดทดลองถูกตรึงไว้ในลำคอ เหยือกแก้วเพื่อไม่ให้แตะก้น; โถถูกแช่อยู่ในภาชนะที่มีน้ำและน้ำแข็ง
ไขมันที่ละลายแล้วจะถูกกวนด้วยเทอร์โมมิเตอร์จนกระทั่งเย็นตัวลงอย่างสม่ำเสมอ หลังจากที่ไขมันสูญเสียความโปร่งใส เทอร์โมมิเตอร์จะถูกทิ้งไว้ตามลำพังและอุณหภูมิจะลดลงทุกๆ 2 นาที
ทันทีที่ไขมันตกผลึก อุณหภูมิจะลดลงช้าลง จากนั้นก็สามารถคงอยู่ที่ระดับเดิมหรือเพิ่มขึ้นเล็กน้อยแล้วลดลงอีกครั้ง เพราะไขมันไม่ได้ สารบริสุทธิ์จุดไหลเทไม่คงที่
การอ่านค่าเทอร์โมมิเตอร์สูงสุดที่สังเกตได้ในระหว่างการตกผลึกของไขมันจะถือเป็นจุดเยือกแข็ง
การหาค่าดัชนีการหักเหของแสง (refraction) ของไขมัน ไขมันที่ทดสอบจะต้องอยู่ในสถานะของเหลว ดังนั้นไขมันสัตว์ที่มีความหนาแน่นสูงจึงถูกละลาย การหาค่าดำเนินการโดยใช้เครื่องวัดการหักเหของแสงต่างๆ คุณสมบัติการหักเหของแสง (refraction) ของไขมันขึ้นอยู่กับปริมาณของไตรกลีเซอไรด์ กรดไขมันอิ่มตัวและไม่อิ่มตัวที่ไขมันมีอยู่
ขั้นแรก ให้ตั้งค่าเครื่องวัดการหักเหของแสงด้วยน้ำกลั่น (n = 1.333) ดัชนีการหักเหของไขมันพบได้ที่อุณหภูมิใกล้กับจุดหลอมเหลว หากจุดหลอมเหลวสูงกว่า 20°C ดัชนีการหักเหของแสงจะถูกคำนวณใหม่โดยใช้สูตร n 20°C = n + (TC - 20°C) 0.00035 โดยที่ n 20°C คือดัชนีการหักเหของแสงที่ 20°C; n คือดัชนีการหักเหของแสงที่อุณหภูมิที่กำลังศึกษา (TC - 20°C) - ความแตกต่างของอุณหภูมิ 0.00035 เป็นค่าคงที่
หยดไขมันที่จะทดสอบจะถูกวางลงบนปริซึมด้านล่างของเครื่องวัดการหักเหของแสง ไฟส่องสว่างจะส่องลำแสงไปที่ปริซึมไฟ การสังเกตจะดำเนินการผ่านช่องมองภาพ
การแบ่งสเกลที่สร้างขอบเขตของไคอาโรสคูโร - นี่จะเป็นดัชนีการหักเหของไขมันที่กำลังศึกษา
การหาปริมาณไอโอดีนของไขมัน ค่าของตัวบ่งชี้นี้ใช้เพื่อตัดสินความเด่นของกรดไขมันอิ่มตัวหรือไม่อิ่มตัวในไขมัน ยิ่งไขมันมีกรดไขมันไม่อิ่มตัวมากเท่าใด ค่าไอโอดีนก็จะยิ่งสูงขึ้นตามไปด้วย
ไขมันทนไฟมีจำนวนไอโอดีนต่ำ ไขมันละลายต่ำมีจำนวนไอโอดีนสูง ดังนั้นจึงสามารถกำหนดชนิดของมันโดยประมาณได้ ขึ้นอยู่กับจำนวนไอโอดีน
การตอบสนองต่อไกลโคเจน ในเนื้อสัตว์สุกของสัตว์ต่าง ๆ ไกลโคเจนมีอยู่ในปริมาณต่อไปนี้: เนื้อวัว - 0.2-0.3% (ในปริมาณเท่ากันในเนื้อแกะและเนื้อหมู), เนื้อม้า - ประมาณ 1.0; เนื้อสุนัข - ประมาณ 2.0; เนื้อแมว - ประมาณ 0.5% ดังนั้นจึงใช้ปฏิกิริยาเชิงคุณภาพต่อไกลโคเจนเพื่อแยกเนื้อแกะออกจากเนื้อสุนัข เนื้อม้าจากเนื้อวัว
ขั้นตอนการพิจารณา: ตัวอย่างเนื้อสัตว์ (15 กรัม) สับด้วยกรรไกร, โอนไปยังขวดและเติมน้ำกลั่น 60 มล. ตัวอย่างเนื้อสัตว์อาจมีขนาดใหญ่หรือเล็กแต่อัตราส่วนของเนื้อต่อน้ำ
มันควรจะเป็น 1:4 เนื้อหาของขวดนำไปต้มและต้มเป็นเวลา 30 นาที น้ำซุปจะถูกกรองผ่านตัวกรองกระดาษและทำให้เย็นลง
เทสารละลายกรอง 5 มล. ลงในหลอดทดลองและเติมสารละลาย Lugol 5-10 หยด หากปฏิกิริยาเป็นบวก น้ำซุปจะเปลี่ยนเป็นสีแดงเชอร์รี่ หากเป็นลบ จะเป็นสีเหลือง หากสงสัยจะเป็นสีส้ม
เนื้อสุนัข ม้า อูฐ หมี แมว ในกรณีส่วนใหญ่ให้ปฏิกิริยาเชิงบวกต่อไกลโคเจน (สารสกัดจากเนื้อแมวอาจทำให้เกิดปฏิกิริยาที่น่าสงสัย)
เนื้อสัตว์จากแกะ แพะ วัว กระต่าย และหมู ให้ปฏิกิริยาเชิงลบต่อไกลโคเจน
ควรระลึกไว้เสมอว่าเนื้อสัตว์เล็กทุกประเภทให้ปฏิกิริยาเชิงบวกต่อไกลโคเจน แต่ตามกฎแล้วเนื้อสัตว์ของสัตว์แก่และป่วยรวมทั้งนำมาจากบริเวณศีรษะและคอจะให้ปฏิกิริยาเชิงลบ ไปจนถึงไกลโคเจน
ปฏิกิริยาการตกตะกอน มันขึ้นอยู่กับการตกตะกอนของโปรตีนสะสมภายใต้อิทธิพลของซีรั่มที่ตกตะกอนบนแอนติเจนที่เกี่ยวข้อง นี่เป็นวิธีการที่แม่นยำที่สุดในการพิจารณาชนิดของเนื้อสัตว์ วิธีนี้สามารถระบุชนิดของเนื้อสัตว์ได้ แม้ว่าจะผ่านการเค็มหรือปรุงสุกแล้วก็ตาม
ในการตั้งค่าปฏิกิริยาจำเป็นต้องมีชุดซีรั่มตกตะกอนที่เหมาะสมรวมถึงซีรั่มเลือดปกติจากสัตว์หลากหลายสายพันธุ์ ผลิตที่สถาบันวิจัยวัคซีนและเซรั่มแห่งเซนต์ปีเตอร์สเบิร์ก และส่งถึงผู้บริโภคเมื่อมีการร้องขอพร้อมบริการเก็บเงินปลายทาง ทศรี การจัดเก็บข้อมูลระยะยาวคลอโรฟอร์มวางอยู่ใต้ซีรั่มและเทลงในขวดโดยมีจุกปิดอยู่ การไตเตรทของซีรั่มที่ตกตะกอนจะถูกกำหนดเบื้องต้นและความจำเพาะของพวกมันจะถูกกำหนด
ตรวจสอบไทเทอร์ของซีรั่มที่ตกตะกอนดังนี้ ซีรั่มปกติของสัตว์บางชนิดจะถูกปิดใช้งานที่อุณหภูมิ 56°C เป็นเวลา 30 นาทีจากแอนติบอดีที่ไม่จำเพาะเจาะจง จากนั้นจึงเจือจางด้วยสารละลายทางสรีรวิทยา 1:100, 1:1000, 1:5000 และ 1:10000 ขึ้นอยู่กับระดับไทเทอร์ที่ระบุบนฉลากของหลอดบรรจุด้วยเซรั่มตกตะกอนเฉพาะ
ปิเปตเซรั่มปกติของการเจือจางแต่ละครั้ง 0.9 มล. ลงในหลอด Ulengut จากนั้นเติมซีรั่มตกตะกอน 0.1 มิลลิลิตรลงในหลอดทดลองแต่ละหลอดโดยใช้ปิเปตของปาสเตอร์ คุณสามารถซ้อนชั้นด้วยปิเปตปาสเตอร์หนึ่งอัน โดยเริ่มจากการเจือจางเวย์ให้มากที่สุด
เหมาะสำหรับการวิจัย ถือได้ว่า การตกตะกอนปากนั้นเมื่อเจือจาง 1:10,000 จะตกตะกอนโปรตีนในซีรั่มของสายพันธุ์เดียวกันภายใน 10 นาที และไม่ตกตะกอนด้วยซีรั่มของสัตว์สายพันธุ์อื่นที่ความเข้มข้น 1:10,000 ภายในหนึ่งชั่วโมง
มีการเตรียมสารสกัดจากเนื้อสัตว์ที่กำลังศึกษาอยู่ ตัวอย่างทดสอบจะถูกแยกออกจากไขมันและเนื้อเยื่อเกี่ยวพันอย่างระมัดระวัง ชอล์กถูกบดและวางในหลอดทดลอง มีการเพิ่ม Physiol เข้าไปด้วย
ในการตั้งค่าปฏิกิริยาการตกตะกอน ให้เตรียมท่อขนาดเล็กหลายๆ แถว (4-7) แถว แถวละ 3 หลอด เทสารสกัดจากเนื้อสัตว์ที่ทดสอบ 0.9 มิลลิลิตรลงในหลอดทดลองแรกของแต่ละแถว ประการที่สอง - สารละลายทางสรีรวิทยา 0.9 มล. และประการที่สาม - ซีรั่มปกติของสัตว์ต่าง ๆ ในปริมาณเท่ากันเจือจาง 1:1,000
ในหลอดทดลองทั้งสามหลอดของแถวแรก 0.1 มล. ของโปรตีนวัวที่ตกตะกอนในซีรั่มจะถูกเติมด้วยปิเปตของปาสเตอร์ที่แตกต่างกันในหลอดทดลองของแถวที่สอง - 0.1 มล. ของโปรตีนม้าที่ตกตะกอนในซีรั่มในหลอดทดลองของแถวที่สาม - 0.1 มล. ของการตกตะกอนเซรั่มหมู ลงในหลอดทดลอง แถวอื่นๆ - ปริมาณเซรั่มแกะ แพะ สุนัข จำนวนเท่ากัน
ปฏิกิริยาจะถูกอ่านบนพื้นหลังสีเข้ม ปฏิกิริยาเชิงบวกจะได้รับการพิจารณาเมื่อมีวงแหวนสีขาวขุ่นปรากฏขึ้นบริเวณที่สัมผัสกันระหว่างของเหลวภายในนาทีแรกหลังจากเติมซีรั่มที่ตกตะกอน ปฏิกิริยาจะมีความเฉพาะเจาะจงหากวงแหวนสีขาวขุ่นปรากฏขึ้นภายใน 1 ชั่วโมงหลังจากเติมซีรั่มที่ตกตะกอนลงในสารสกัด ตะกอนที่เกิดขึ้นในภายหลังถือว่าไม่เฉพาะเจาะจง
ปฏิกิริยาเชิงบวกในหลอดที่หนึ่งและสามของแถวเดียวกันบ่งชี้ว่าเนื้อสัตว์ที่ทดสอบเป็นของสัตว์ที่ตรงกับความจำเพาะของซีรั่ม ในแถวอื่นๆ ทั้งหมดในหลอดทดลองหลอดแรก ปฏิกิริยาควรเป็นลบ และในหลอดทดลองหลอดที่สาม - เป็นบวก ในหลอดทดลองที่สองของทุกแถว (ควบคุมตัวอย่างด้วยน้ำเกลือ) ปฏิกิริยาควรเป็นลบ
ตัวอย่างเช่น หากสารสกัดที่ศึกษาเตรียมมาจากเนื้อม้า ผลลัพธ์ของปฏิกิริยาในหลอดทดลองทั้งหมดควรเป็นดังนี้ (ตารางที่ 14)