Determinarea speciilor de carne prin metoda precipitarii. Determinarea grupei de sânge. Metode de laborator pentru stabilirea speciilor de carne

O încercare de a trece carnea unui tip de animal drept carnea unui alt tip de animal, de obicei mai valoroasă, se numește falsificare a speciilor și poate apărea pe piețele din rețeaua comercială si institutii Catering. Prin urmare, un medic veterinar trebuie să fie capabil să determine specia de carne. De obicei, falsificarea speciilor utilizează carcase de animale care sunt similare ca mărime, formă și alte caracteristici. Așa că de obicei încearcă să treacă carnea de cal drept vită și invers (în unele țări în care carnea de cal este apreciată mai mult), carcasele câinilor de talie mare sunt trecute drept miel, pisicile sunt încercate să fie trecute drept iepuri și nutrie. Pentru determinarea speciilor de carne se folosesc metode obiective și subiective.

Metode subiective de determinare a speciei de carne. Metodele subiective includ configurația, caracteristicile morfologice și organoleptice ale cărnii etc. Astfel, de exemplu, la inspecția vizuală, carcasa unui cal are un gât mai lung și o crupă bine musculată, în timp ce carcasele de vacă au o crupă mai scurtă, care este mai plată, crupa. adesea proeminente și tuberozități ischiatice; carnea de cal are o culoare mai închisă, deși carnea de vită veche sau slab sângerată poate fi de culoare roșu închis, carnea de cal are vizual fibre musculare mai albe, mai mari și mai clar definite în comparație cu carnea de vită.

tabelul 1

Caracteristici specifice ale structurii oaselor scheletului de vacă și cal


	Nu există deschideri ale aripilor posterioare, există o crestătură a aripii posterioare	Există față și spate orificiile aripilor
Epistrofie	Procesul odontoid este gol, de formă semilună	Procesul odontoid este convex, în formă de daltă
	Plat fără creastă, are 6 fose articulare pe fiecare parte	Comprimat din laterale are bine creastă pronunțată și 8 fose articulare
	Sacrul este plat, este format din 5 vertebre fuzionate, procesele spinoase sunt situate separat unele de altele	Sacrul este convex, complet fuzionat, este format din 5 vertebre complet fuzionate, procesele spinoase sunt topite într-o creastă continuă
	Lat, plat, 13 perechi	Îngust, în formă de butoi în secțiune transversală, 18 perechi
	Gâtul este scurt, coloana vertebrală este înaltă și atârnă peste gât, se termină cu acromion, raportul părților prespinoase și infraspinoase este de 1:4	Gâtul este lung, coloana vertebrală este joasă, coboară spre gâtul scapulei, nu există acromion, raportul părților prespinoase și postspinoase este de 1:3
humerală	Are două în formă de bloc proces și rugozitate în loc de trohanter	Are trei procese trohleare și un trohanter foarte dezvoltat
Radial și ulnar	Raza și ulna au aceeași lungime	Raza ajunge la mijlocul ulnei
femural	Procesele și proeminențele sunt netezite, trohanterul mare este monolitic, trohanterul mic este sub forma unui tubercul bont, al treilea trohanter este absent.	Trohanterul mare este împărțit în două părți, clar definite trohanterul mic și al treilea
Tibia	Tibia este curbată spre partea medială, tibia este sub forma unui proces rudimentar	Tibia are o secțiune transversală triunghiulară, fibula o însoțește până la mijloc
Vertebrele toracice și lombare	Procesele spinoase ale vertebrelor sunt plate, situate vertical, partea lor superioară este îndreptată înainte	Apofizele spinoase se termină într-o îngroșare în formă de buton și se ating

Metode obiective de determinare a speciei de carne Metode de determinare a speciei de carne

De cea mai mare importanță sunt metodele obiective care ar trebui utilizate în compilare concluzii oficiale. Astfel de metode includ: caracteristicile anatomice ale structurii oaselor scheletice, punctul de topire al grăsimii, conținutul de glicogen din carne și reacția de precipitare cu seruri precipitante specifice speciei.

Determinarea speciilor în funcție de caracteristicile anatomice ale structurii oaselor scheletice și organe interne

Din orice os al scheletului și chiar din fragmentul acestuia, puteți determina specia de carne. De bază trăsături distinctive oasele scheletice similare la animalele comparate sunt prezentate în tabel. 12.

Masa. 2

Caracteristici specifice ale structurii oaselor scheletului unei pisici, iepure și nutrie


	Raport	Raportul de lungime	forma de diamant
lungime si latime	și lățimea lamei	noi, raport
omoplați 1:3, gât	1:2, gât scurt,	lungime si latime
ce coloana vertebrala lunga	coloana vertebrală înaltă, navigație	omoplați 1:1, coloana vertebrală
scăzut,	stă peste gât,	scăzut, acromion
se ramifică în	împușcare de ramuri -	începe lungi-
două părți	si este dirijat	din treimea mijlocie

Femural	Are o mare	Are o durere-	Are un mare și
	trohanterul mic și al treilea	frigarui zdrobit	al treilea trohanter mai mic este absent
Oasele tibiei	Fibula este rudimentară	Tibia și peronéul	Bretele tibial și peronier
tificat și fuzionează cu durerea	legate prin articulații mobile	sunt legate prin articulații mobile
tibial terminat in treimea sa superioara	suprafețe, tibia este mult mai groasă decât peronéul	suprafețe, tibia și fibula au aproape aceeași grosime.
	Lung, este format din patru vertebre cu spinoase separate înalte	Scurt cu trei volum mic de muguri diferite procese la capete	Constă din patru vertebre masive cu procese spinoase separate
lăstari

La determinarea cărnii mici bovineși câini, ar trebui să se țină cont de faptul că oasele vitelor mici sunt în formă de vacă.

Pe baza caracteristicilor anatomice ale structurii organelor interne, este, de asemenea, posibil să se determine cu exactitate speciile de carne și produse de sacrificare.

Ficatul de vacă este masiv, de formă convex-concavă, de culoare maro închis, lobulația este slab exprimată, în dreapta pe partea ventrală există o crestătură interlobară în care se află vezica biliară. Ficatul calului este mare și clar împărțit în trei lobi, lobul drept este separat de lobul mijlociu printr-o crestătură adâncă, iar lobul stâng de lobul mijlociu de ligamentul rotund; vezica biliară este absentă. Ficatul câinelui este mai mare decât al vitelor mici și este împărțit în șapte lobi. Plămânii unei vaci au un model de plasă clar, împărțiți clar în lobi cranieni, mediali și caudali; lobul anterior cranian este împărțit în două jumătăți; există un lob accesoriu în plămânul drept. La cal, lobulația plămânului este slab exprimată; marginea ascuțită a fiecărui plămân are o fisură interlobară plată care separă lobul caudal de cel cranian. La câini, spre deosebire de oi și capre, modelul de plasă de pe plămâni este invizibil, iar lobii plămânilor sunt separați de fisuri interlobare profunde care se extind până la bronhii.

Rinichii unei vaci sunt formați din 16-18 lobi. Caii au rinichi uni papilari, cel din stânga este alungit sau în formă de fasole, iar cel drept este în formă de inimă.

Splina unei vaci este plată, alungită și are marginile rotunjite. Calul are o splină plată, în formă de seceră. Marginea anterioară este concavă și ascuțită, marginea posterioară este convexă și tocită. Splina câinelui este plată și neregulat de formă triunghiulară, capătul inferior este lărgit și capătul superior este îngustat.

Inima unei vaci are un vârf mai ascuțit decât cel al unui cal; în plus, peretele ventriculului stâng al unui cal este de 2,5 ori mai gros decât cel al dreptului. Inima oilor și caprelor are un vârf ascuțit, în timp ce câinii au o inimă rotunjită.

Limba unei vaci are un capăt gros care este ascuțit, în treimea mijlocie există o îngroșare asemănătoare unei role și o epiglotă de formă ovală. Limba calului este mai lungă și mai plată, capătul său este rotunjit, iar epiglota este rotunjită. Câinii, spre deosebire de vitele mici, au o limbă largă și plată, cu margini ascuțite; există un șanț central pe suprafața sa superioară.

Determinarea punctului de topire al grăsimii Punctul de topire al grăsimii este strict individual pentru animale tipuri diferite si deci este un indicator obiectiv al determinarii speciei de carne. Mai mult, acest indicator la speciile de animale comparate diferă de 1,5-2 ori, ceea ce simplifică semnificativ diagnosticul.

Stabilirea reacției Grăsimea studiată este topită și colectată în capilare de sticlă transparentă cu diametrul de 1,5 mm. Înălțimea coloanei de grăsime ar trebui să fie de 5-7 mm. Pune capilarele cu grăsime la frigider pentru 1-2 ore. După răcire, capilarul cu grăsime este fixat de termometru folosind o bandă elastică, astfel încât coloana de grăsime să fie la nivel cu capul termometrului. După aceasta, termometrul împreună cu capilarul este fixat pe un trepied și coborât într-un pahar transparent umplut cu apă și așezat pe o sobă electrică, astfel încât partea superioară a capilarului să fie deasupra suprafeței apei (vezi Fig. I) . Apoi incep sa incalzeasca apa amestecand-o cu o bagheta de sticla. Încălzirea se continuă până când coloana de grăsime devine transparentă și, sub presiunea apei, începe să se ridice în capilar. În acest moment se face citirea termometrului. Măsurarea se repetă de cinci ori și se găsește media aritmetică. Rezultatul obţinut este considerat punctul de topire al grăsimii studiate. Punctul de topire al grăsimii la unele mamifere și păsări este dat în tabel. 3.

Determinarea conținutului de glicogen în mușchi

În carnea animalelor comparate, conținutul de glicogen diferă de 2-3 ori. De exemplu, conținutul de glicogen din carnea cailor, câinilor și pisicilor este semnificativ mai mare decât în carnea vacilor, bovinelor mici și iepurilor, ceea ce face posibilă utilizarea unei reacții calitative la glicogen pentru a determina specia de carne. Cu toate acestea, trebuie reținut că conținutul de glicogen nu este constant și depinde de starea animalului la momentul sacrificării, de condițiile de maturare și de durata de păstrare a cărnii.

Stabilirea unei reacții

Se prelevează o probă din carnea testată, se toarnă, se toarnă cu apă distilată în raport de 1:4 și se fierbe într-un balon timp de 30 de minute. Bulionul se filtrează printr-un filtru de hârtie și se răcește. Într-o eprubetă se iau 5 ml bulion și se adaugă 5-10 picături de soluție Lugol.

Ține cont de reacție

Dacă reacția este pozitivă (tipică pentru cai, câini și pisici), conținutul eprubetei devine roșu vișiniu sau liliac.

În cazul unei reacții discutabile (apare la pisici), culoarea va fi portocalie

Dacă reacția este negativă (tipică pentru vaci, oi și capre), conținutul tubului va fi galben.

Reacția de precipitare cu seruri specifice speciei

Reacția cu serurile precipitante specifice speciei este una dintre cele mai precise metode de identificare a speciilor de carne. Folosind această reacție, puteți examina nu numai carnea, ci și carnea tocată și chiar produsele semifabricate și puteți determina adăugarea de carne de la alt tip de animal la aceste produse.

Enunț de reacție 43 a cărnii studiate, carne tocată, semifabricate, se prepară un extract. Pentru a face acest lucru, o probă de produs este măcinată în carne tocată și umplută cu soluție de clorură de sodiu 0,9% în raport de 1:1 și extrasă timp de 3 ore, după care este filtrată printr-un filtru de hârtie (extractul trebuie să fie transparent). .

Punctul de topire al grăsimii animale de diferite specii

Raportul optim pentru reacție este de 1:1000 proteine pentru a extrage.

Pentru a stabili reacția, trei rânduri de tuburi Ulengut sunt plasate într-un suport. Folosind o pipetă, introduceți 0,9 ml din extractul studiat în eprubetele din primul rând, 0,9 ml de soluție de clorură de sodiu 0,9% în eprubetele din al doilea rând și 0,9 ml de ser standard în eprubetele din primul rând. al treilea rând. tipuri variate animale având aceeași diluție ca serurile de precipitare diagnostic. Apoi, folosind o pipetă Pasteur, se adaugă în fiecare dintre cele trei eprubete 0,1 ml de ser de diagnostic care precipită cu proteina unei anumite specii de animale.

Ține cont de reacție

Reacția se înregistrează după 10 minute. Reacția este considerată fiabilă dacă conținutul eprubetei cu soluție salină rămâne transparent și se formează un inel de precipitare în eprubeta cu ser standard.

Dacă într-o eprubetă se formează același inel cu extractul studiat, atunci reacția este considerată pozitivă și se stabilește specia de carne. Dacă conținutul acestui tub rămâne transparent, atunci reacția este considerată negativă și se continuă studiile cu seruri ale altor specii de animale.

/ Tishinova L.A. // Mater. II Panto-rus. Congresul Medicilor legiști: rezumate ale rapoartelor. - Irkutsk-M., 1987. — P. 264-266.

Determinarea speciilor de obiecte de origine biologică

descriere bibliografica:
Determinarea speciilor de obiecte de origine biologică / Tishinova L.A. // Mater. II Panto-rus. Congresul Medicilor legiști: rezumate ale rapoartelor. - Irkutsk-M., 1987. - P. 264-266.

cod html:
/ Tishinova L.A. // Mater. II Panto-rus. Congresul Medicilor legiști: rezumate ale rapoartelor. - Irkutsk-M., 1987. - P. 264-266.

cod de încorporare pentru forum:
Determinarea speciilor de obiecte de origine biologică / Tishinova L.A. // Mater. II Panto-rus. Congresul Medicilor legiști: rezumate ale rapoartelor. - Irkutsk-M., 1987. - P. 264-266.

wiki:
/ Tishinova L.A. // Mater. II Panto-rus. Congresul Medicilor legiști: rezumate ale rapoartelor. - Irkutsk-M., 1987. - P. 264-266.

Pentru a stabili identitatea speciei urmelor de sânge și secreții, în practica criminalistică sunt utilizate teste imunologice, reacția de amorsare în diverse modificări și reacția de imunofluorescență. Folosind reacția de imunofluorescență, se determină și originea speciei celulelor individuale. Cu toate acestea, pot exista situații în care aceste teste sunt ineficiente. Acest lucru se observă în cazurile în care obiectele examinate au fost expuse unor factori nefavorabili și, prin urmare, au existat distrugeri ale proteinei specifice speciei sau modificări care au împiedicat detectarea acesteia.

În legătură cu cele de mai sus, există necesitatea dezvoltării unor metode suplimentare pentru stabilirea identității de specie a obiectelor de origine biologică.

Un interes deosebit în acest aspect este antigenul H, care, judecând după literatură (M. Kriere, 1956; W. Reimann, S. Popvassileff, 1960; A.K. Tumanov, 1975), este conținut în sângele uman, indiferent de apartenența la grup. sistemul ABO, precum și categoria de excreție, și este absent la animale. Se știe că acest antigen, care este un polizaharid, are o rezistență mai mare în comparație cu antigenele proteice (G.A. Sergeeva, Yu.D. Alekseev, 1981; E.I. Koroleva, 1983).

Scopul studiului nostru este de a determina semnificația antigenului H al sistemului ABO ca test specific speciei pentru stabilirea apartenenței obiectelor biologice identificate pe dovezi fizice la o persoană.

Experimentul a implicat determinarea antigenului H în lichid, sânge uscat și salivă, celule epiteliale bucale a 132 de donatori bărbați și femei cu vârsta cuprinsă între 26 și 56 de ani din toate grupurile conform sistemului ABO, dintre care 16 erau neexcretori de proprietăți de grup. Au fost studiate, de asemenea, sânge lichid și uscat de la 32 de vaci, 26 de oi, 24 de porci, 26 de câini, 7 pisici, 6 cai și celule epiteliale bucale a 8 câini și 4 pisici. Pentru sângele lichid, s-a folosit o reacție de aglutinare pe un avion și în eprubete folosind ser heteroimun anti-H. precum și lectine (extrase din fructe de soc, semințe de mătură și fasole Vaterer), pentru sânge uscat - reacție de absorbție a aglutininelor în modificare cantitativă și absorbție-eluție cu aceiași reactivi, saliva - reacție de absorbție a aglutininelor în modificare cantitativă , celule - reacție de imunofluorescență .

La toți cei 132 de donatori, antigenul H a fost determinat indiferent de apartenența la grup; a fost la fel de clar dezvăluit de toate reacțiile atât la excretori, cât și la non-excretori, dar la cei din urmă, la utilizarea RIF, s-a observat o scădere a numărului de celule strălucitoare și a strălucirii strălucirii.

La niciuna dintre animalele studiate (în reacții lectinele menționate mai sus, ser luminescent anti-oaie și anti-H heteroimun) nu a fost stabilit antigenul H.

Literatura notă și datele proprii cu privire la specificitatea de specie a antigenului H ne-au permis să folosim acest test pentru a determina speciile de obiecte de origine biologică în 7 observații din practică. Într-una dintre ele, a fost examinat periostul, în patru - celule epiteliale ale pielii izolate (obiectele au fost luate din îmbrăcăminte, catarama de centură, un tractor, în incendiu), în două - urme de sânge pe piele și o cheie reglabilă. Nu a fost posibilă stabilirea identității de specie a acestor obiecte prin reacția de precipitare; totuși, antigenul H a fost identificat prin imunofluorescență și reacții de aglutinare mixtă.

Astfel, observațiile noastre experimentale și practice indică faptul că antigenul H nu este detectat la animale, dar este detectat la fel de clar în sângele și celulele țesuturilor tuturor oamenilor, indiferent de apartenența la grup în funcție de sistemul ABO și de categoria de excreție. În consecință, prezența acestui antigen este un test suplimentar specific speciei care ne permite să judecăm dacă un obiect aparține unei persoane. Antigenul H poate fi utilizat pentru a determina speciile de secreții, precum și sângele, țesuturile corpului și celulele izolate.

Definiție specii afilierea de sânge - rezolvarea problemei apartenenței sale (animale sau umane). Determinarea tipului de sânge este condiție prealabilă pentru cercetările ulterioare pentru a determina grupele sanguine și posibilitatea provenienței sale de la o anumită persoană. Un astfel de studiu face, de asemenea, posibilă verificarea versiunii suspectului cu privire la originea sângelui de pe haine și arme de crimă de la un anumit animal. Stabilirea faptului despre originea sângelui de la un anumit animal sau pasăre poate fi, de asemenea, un studiu independent în cazul braconajului, unui accident de avion și în alte circumstanțe.

Orez. 93. Reacţie Chistovici.
Stânga - pozitiv; în dreapta - negativ.

Speciile de sânge se determină folosind reacția de precipitare. Această reacție implică glugă din colorare (proteine din sânge – antigene) și precipitare ser(anticorpi), capabile să reacționeze numai cu proteina unei persoane sau a unui anumit animal - cal, câine, porc, vite etc. Interacțiunea specifică a antigenelor și anticorpilor speciilor se manifestă prin formarea unui sediment (precipitat). Expertul stabilește care dintre serurile introduse în reacție formează un precipitat, iar pe baza acestuia determină tipul de sânge din pată. Pentru control, se fac experimente și cu extracte dintr-un obiect din afara petelor de sânge (Fig. 93).
Reacția de precipitare este foarte sensibilă. Rezultatul său depinde în mare măsură de starea proteinelor din sânge, în principal de solubilitatea acestora. Prin urmare, manipularea necorespunzătoare a dovezilor materiale, în special uscarea acestora la temperaturi ridicate, poate duce la tranziția proteinelor din sânge la o stare insolubilă, ceea ce împiedică stabilirea tipului lor. Transportul de haine umede cu urme de sânge duce la putrezirea și denaturarea proteinelor, ceea ce face imposibilă determinarea tipului de sânge.

Orez. 94. Reacția de precipitare în agar (explicație în text).

Reacţie Precipitarea se realizează de obicei în eprubete cu un capăt subțire. Mai întâi, se pune în ele un extract din pata studiată, iar apoi serul precipitat este aruncat în fundul tuburilor cu o pipetă. Dacă reacția este pozitivă, la interfața dintre ser și extract se formează un precipitat sub forma unei turbidități în formă de disc. Absența sedimentului în eprubeta de control cu un extract din obiectul purtător permite în astfel de cazuri să se tragă o concluzie despre un anumit tip de sânge în pata de testare. Un rezultat negativ de precipitare cu toate serurile care precipită se poate datora distrugerii sau insolubilității proteinelor din sânge, cantității insuficiente de sânge sau prezenței sângelui de la alt animal. În astfel de cazuri, se recurge la concentrarea extractelor și la utilizarea unor metode mai sensibile de determinare specii accesorii de sange - reactii de precipitare pe hartie speciala de cromatografie, reactii de precipitare in agar, metode de electroprecipitare etc. Reactia de precipitare in agar se foloseste si in cazurile in care turbiditatea extractului impiedica cercetarea in mediu lichid. Pe pahar se toarnă un strat de agar topit, după ce se întărește, în el se fac depresiuni, în unele dintre care se pune extractul din pată, iar în altele - serul precipitant. Ele difuzează în agar și când extractul (antigenele) și serul precipitant se întâlnesc, dacă sunt omoloage, se formează un precipitat sub formă de bandă albicioasă. Dacă glugăȘi ser heterolog, nu se formează precipitat (Fig. 94).
Pentru a face distincția între sângele uman și cel animal (pe baza conținutului unui număr de elemente anorganice), poate fi utilizată și metoda analizei spectrale de emisie. În prezent, pentru a crește sensibilitatea și rezoluția reacției de precipitare, un indicator laser este utilizat ca un înregistrator al formării precipitatului. Metoda vă permite să determinați tipul de sânge în pete mixte și greu solubile, în urme de sânge pe obiecte purtătoare contaminate.
În prezent, pentru determinarea speciei de sânge, se recomandă și metoda imunofluorescenței, în care serul aglutinant este combinat cu un fluorocrom. În cazul unui rezultat pozitiv, la examinarea obiectului în raze ultraviolete, este vizibilă o strălucire într-o culoare corespunzătoare fluorocromului cu care a fost anterior combinat serul.

Determinarea tipului de sânge este o soluție la problema apartenenței acestuia (animal sau uman). Determinarea tipului de sânge este o condiție prealabilă pentru cercetările ulterioare pentru a determina grupele de sânge și posibilitatea originii acestuia de la o anumită persoană. Un astfel de studiu face, de asemenea, posibilă verificarea versiunii suspectului cu privire la originea sângelui de pe haine și arme de crimă de la un anumit animal. Stabilirea faptului despre originea sângelui de la un anumit animal sau pasăre poate fi, de asemenea, un studiu independent în cazul braconajului, unui accident de avion și în alte circumstanțe.

Orez. 93. Reacția lui Chistovici.
Stânga - pozitiv; în dreapta - negativ.

Speciile de sânge se determină folosind reacția de precipitare. Această reacție implică un extract din pată (proteine din sânge - antigene) și ser precipitant (anticorpi), capabil să reacționeze numai cu proteina unei persoane sau a unui anumit animal - cal, câine, porc, vite etc. Interacțiunea specifică a antigenele și anticorpii speciilor se manifestă prin formarea unui precipitat (precipitat). Expertul stabilește care dintre serurile introduse în reacție formează un precipitat, iar pe baza acestuia determină tipul de sânge din pată. Pentru control, se fac experimente și cu extracte dintr-un obiect din afara petelor de sânge (Fig. 93).

Reacția de precipitare este foarte sensibilă. Rezultatul său depinde în mare măsură de starea proteinelor din sânge, în principal de solubilitatea acestora. Prin urmare, manipularea necorespunzătoare a dovezilor materiale, în special uscarea acestora la temperaturi ridicate, poate duce la tranziția proteinelor din sânge la o stare insolubilă, ceea ce împiedică stabilirea tipului lor. Transportul de haine umede cu urme de sânge duce la putrezirea și denaturarea proteinelor, ceea ce face imposibilă determinarea tipului de sânge.

Reacția de precipitare este de obicei efectuată în eprubete cu un capăt subțire. Mai întâi, se pune în ele un extract din pata studiată, iar apoi serul precipitat este aruncat în fundul tuburilor cu o pipetă. Dacă reacția este pozitivă, la interfața dintre ser și extract se formează un precipitat sub forma unei turbidități în formă de disc. Absența sedimentului în eprubeta de control cu un extract din obiectul purtător permite în astfel de cazuri să se tragă o concluzie despre un anumit tip de sânge în pata de testare. Un rezultat negativ de precipitare cu toate serurile care precipită se poate datora distrugerii sau insolubilității proteinelor din sânge, cantității insuficiente de sânge sau prezenței sângelui de la alt animal. În astfel de cazuri se recurge la concentrarea extractelor și la utilizarea unor metode mai sensibile pentru determinarea tipului de sânge - reacții de precipitare pe hârtie specială pentru sânge, reacții de precipitare în agar, metode de electroprecipitare etc. Reacția de precipitare în agar este folosită și în cazuri. unde turbiditatea extractului împiedică cercetarea în mediu lichid. Pe pahar se toarnă un strat de agar topit, după ce se întărește, în el se fac depresiuni, în unele dintre care se pune extractul din pată, iar în altele - serul precipitant. Ele difuzează în agar și când extractul (antigenele) și serul precipitant se întâlnesc, dacă sunt omoloage, se formează un precipitat sub formă de bandă albicioasă. Dacă extractul și serul sunt heteroloage, nu se formează precipitat (Fig. 94).

Orez. 94. Reacția de precipitare în agar (explicație în text).

Pentru a face distincția între sângele uman și cel animal (pe baza conținutului unui număr de elemente anorganice), poate fi utilizată și metoda analizei spectrale de emisie. În prezent, pentru a crește sensibilitatea și rezoluția reacției de precipitare, un indicator laser este utilizat ca un înregistrator al formării precipitatului. Metoda vă permite să determinați tipul de sânge în pete mixte și greu solubile, în urme de sânge pe obiecte purtătoare contaminate.

În prezent, pentru determinarea speciei de sânge, se recomandă și metoda imunofluorescenței, în care serul aglutinant este combinat cu un fluorocrom. În cazul unui rezultat pozitiv, la examinarea obiectului în raze ultraviolete, este vizibilă o strălucire într-o culoare corespunzătoare fluorocromului cu care a fost anterior combinat serul.

Speciile de carne de animale domestice, sălbatice și păsări se stabilesc pentru soluționarea problemelor legate de justiție

Examinare veterinară în cazuri de înlocuire a cărnii una cu alta (falsificare), braconaj, furt.

Există metode aproximative și fiabile (exacte) pentru determinarea speciilor de carne.

Valorile aproximative sunt: punctul de topire și punctul de îngheț al grăsimii cărnii studiate, numărul de iod, densitatea, indicele de refracție; prezența (reacție calitativă) și concentrația de glicogen în țesutul muscular, indicatori organoleptici ai grăsimii și cărnii:

Metodele de încredere (precise) pentru determinarea speciei de carne sunt formularea reacției de precipitare (în prezența serurilor hiperimune) și caracteristicile anatomice! a-a structură a oaselor scheletului (dacă există).

Câțiva indicatori fizico-chimici ai diferitelor tipuri de grăsimi topite comestibile sunt dați în tabel. 13.

Determinarea punctului de topire al grăsimii. Grăsimea topită și filtrată din proba de testat este colectată într-un capilar de sticlă curat și uscat, cu un diametru de 1,4-1,5 mm. Lungimea coloanei de grăsime în capilar ar trebui să fie de aproximativ 20 mm. Pentru ca grăsimea să se solidifice complet, capilarul se ține în el timp de 1-2 ore într-un frigider de uz casnic sau pe gheață. După răcire, capătul tubului capilar umplut cu grăsime este tăiat (rupt), lăsând o coloană de grăsime de cel puțin 5 mm lungime. Capilarul este atașat cu un inel de cauciuc la un termometru chimic, astfel încât capătul umplut cu grăsime să fie cu fața în sus și capătul fără grăsime cu fața în jos. Termometrul cu capilar este plasat într-o eprubetă (diametru 20-25 mm) și fixat în ea folosind un dop cu orificiu pentru termometru. Termometrul nu trebuie să atingă pereții eprubetei. Tubul de testare este fixat într-un suport, coborât într-un pahar cu apă, iar nivelul apei din pahar trebuie să fie mai mare decât capătul superior al capilarului. Apa din pahar se incalzeste lent si pe un fundal inchis, printr-o lupa, se observa citirea termometrului si starea grasimilor din capilar. Citirea termometrului în momentul în care grăsimea începe să curgă în josul capilarului și se formează spațiu liber în partea superioară este notă ca temperatura de topire a grăsimii. Determinarea se efectuează de două ori, iar rezultatul este considerat media aritmetică a celor două teste; acestea nu trebuie să difere cu mai mult de 0,5°C.

Determinarea punctului de îngheț al grăsimii. Punctul de curgere este cea mai mare temperatură care rămâne constantă pentru o perioadă scurtă de timp în timpul tranziției grăsimii de la starea lichidă la starea solidă. Punctul de curgere depinde de compoziție chimică grăsime și este folosit nu numai pentru a evalua gradul de puritate al grăsimilor, ci și pentru a determina aproximativ specia. Grăsimea de testat se topește într-o baie de apă, se filtrează, se usucă și se toarnă într-o eprubetă. Temperatura grăsimii ar trebui să fie cu 12-15°C mai mare decât punctul de îngheț așteptat. Eprubeta este închisă cu un dop în care se introduce un termometru cu o scară împărțită în cincimi sau zecimi de grad. Termometrul este întărit astfel încât bila sa de mercur să fie în mijlocul stratului de grăsime și să nu intre în contact cu pereții și fundul eprubetei.

Eprubeta este fixată în gât Borcan de sticlă astfel încât să nu atingă fundul; Borcanul este scufundat într-un vas cu apă și gheață.

Grăsimea topită se amestecă cu un termometru până se răcește uniform. După ce grăsimea își pierde transparența, termometrul este lăsat singur și se observă o scădere a temperaturii la fiecare 2 minute.

Din momentul în care grăsimea se cristalizează, scăderea temperaturii încetinește, apoi poate rămâne la același nivel sau poate crește ușor și scădea din nou. Pentru că grăsimile nu sunt substante pure, punctul lor de curgere este instabil.

Citirea maximă a termometrului observată în timpul cristalizării grăsimii este considerată ca punct de îngheț.

Determinarea indicelui de refracție (refracția) grăsimii. Grăsimea testată trebuie să fie în stare lichidă, astfel încât grăsimile animale dense sunt topite. Determinarea se efectuează folosind diferite refractometre. Proprietățile de refracție a luminii (refracția) grăsimii depind de cantitatea de trigliceride, acizi grași saturați și nesaturați pe care le conține.

Mai întâi, refractometrul este configurat cu apă distilată (n = 1,333). Indicele de refracție al grăsimii se găsește la o temperatură apropiată de punctul său de topire. Dacă punctul de topire este peste 20°C, atunci indicele de refracție este recalculat folosind formula n 20°C = n + (TC - 20°C) 0,00035, unde n 20°C este indicele de refracție la 20°C; n este indicele de refracție la temperatura studiată; (TC - 20°C) - diferență de temperatură; 0,00035 este o valoare constantă.

O picătură de grăsime testată este plasată pe prisma inferioară a refractometrului. Iluminatorul direcționează un fascicul de lumină în prisma de iluminare. Observarea se realizează prin ocular.

Se stabilește diviziunea scării prin care trece granița clarobscurului - acesta va fi indicele de refracție al grăsimii studiate.

Determinarea numărului de iod al grăsimilor. Valoarea acestui indicator este folosită pentru a aprecia predominanța acizilor grași saturați sau nesaturați în grăsimi. Cu cât o grăsime conține mai mulți acizi grași nesaturați, cu atât valoarea sa de iod este mai mare.

Grăsimile refractare au un număr scăzut de iod, grăsimile cu topire scăzută au un număr mare de iod, prin urmare, pe baza numărului de iod, se poate determina aproximativ specia acestuia.

Răspuns la glicogen. În carnea coaptă a diferitelor animale, glicogenul este conținut în următoarele cantități: carne de vită - 0,2-0,3% (aproximativ aceeași cantitate în carnea de miel și porc), carne de cal - aproximativ 1,0; carne de câine - aproximativ 2,0; carne de pisică - aproximativ 0,5%. Prin urmare, o reacție calitativă la glicogen este folosită pentru a distinge carnea de miel de cea de câine, carnea de cal de cea de vită.

Procedura de determinare: o probă de carne (15 g) se toacă cu foarfece, se transferă într-un balon și se adaugă 60 ml apă distilată. Proba de carne poate fi mai mare sau mai mică, dar raportul dintre carne și apă

Ar trebui să fie 1:4. Conținutul balonului se aduce la fierbere și se fierbe timp de 30 de minute. Bulionul se filtrează printr-un filtru de hârtie și se răcește.

Într-o eprubetă se toarnă 5 ml de filtrat și se adaugă 5-10 picături de soluție de Lugol. Dacă reacția este pozitivă, bulionul devine roșu vișiniu, dacă negativ, galben, dacă este îndoielnic, portocaliu.

Carnea unui câine, cal, cămilă, urs, pisică dă în cele mai multe cazuri o reacție pozitivă la glicogen (un extract din carne de pisică poate da o reacție îndoielnică).

Carnea de oaie, capră, bovine, iepure și porc dă o reacție negativă la glicogen.

Trebuie avut în vedere că carnea animalelor tinere de toate tipurile dă o reacție pozitivă la glicogen, dar carnea animalelor bătrâne și bolnave, precum și cea luată din zona capului și gâtului, de regulă, dă o reacție negativă. la glicogen.

Reacția de precipitare. Se bazează pe precipitarea unui depozit proteic sub influența precipitarii serului asupra antigenului corespunzător. Aceasta este metoda cea mai precisă pentru determinarea speciei de carne. Această metodă poate determina specia de carne, chiar dacă a fost sărată sau gătită.

Pentru a stabili reacția, este necesar să existe un set de seruri de precipitare adecvate, precum și ser de sânge normal de la animale de diferite specii. Sunt produse la Institutul de Cercetare a Vaccinurilor și Serurilor din Sankt Petersburg și trimise consumatorilor la cerere cu ramburs la livrare. Tsri depozitare pe termen lung Cloroformul este stratificat sub ser și turnat în sticle cu dopuri măcinate. Titrul serurilor precipitate este determinat în prealabil și se determină specificitatea acestora.

Titrul serului precipitat este verificat după cum urmează. Serul normal al unei anumite specii de animale este inactivat la o temperatură de 56°C timp de 30 de minute de la anticorpi nespecifici. Apoi se diluează cu soluție fiziologică 1:100, 1:1000, 1:5000 și 1:10000, în funcție de titrul indicat pe eticheta fiolei cu serul precipitant specific.

Se pipetează 0,9 ml de ser normal din fiecare diluție în tuburi Ulengut. Apoi, se adaugă 0,1 ml de ser precipitant în fiecare eprubetă folosind o pipetă Pasteur. Îl puteți stratifica cu o pipetă Pasteur, începând cu diluția maximă a zerului.

Potrivită pentru cercetare este considerată acea gură precipitatoare care, la o diluție de 1:10.000, precipită proteina serică a aceleiași specii în 10 minute și nu precipită cu serul altor specii de animale la o diluție de 1:10.000. intr-o ora.

Din carnea studiată se prepară un extract. Proba de testat este eliberată cu grijă de grăsime și țesut conjunctiv, creta este zdrobită și plasată într-o eprubetă; Acolo se adaugă și Physiol
Pentru a configura reacția de precipitare, pregătiți mai multe (4-7) rânduri de tuburi mici, câte trei tuburi pe rând. 0,9 ml de extract din carnea testată se toarnă în primele eprubete din fiecare rând; în al doilea rând - 0,9 ml de soluție fiziologică și în al treilea rând - același volum de ser normal de diferite animale diluat 1:1000.

În toate cele trei eprubete de pe primul rând, se adaugă 0,1 ml de proteină de vacă precipitantă seric cu diferite pipete Pasteur, în eprubete de pe al doilea rând - 0,1 ml de proteină de cal precipitată de ser, în eprubete din al treilea rând - 0,1 ml de ser de porc precipitat, în eprubete de alte rânduri - aceeași cantitate de ser de oaie, capră, câine.

Reacția este citită pe un fundal întunecat. O reacție pozitivă este considerată atunci când apare un inel alb tulbure la locul de contact al lichidelor în primele minute după adăugarea serului precipitant. Reacția va fi specifică dacă apare un inel alb tulbure în decurs de 1 oră după adăugarea serului precipitant la extract; sedimentele formate ulterior sunt considerate nespecifice.

O reacție pozitivă în primul și al treilea tub de pe același rând indică faptul că carnea testată aparține unui animal care se potrivește cu specificul serului. În toate celelalte rânduri din primele eprubete, reacția ar trebui să fie negativă. Și în a treia eprubete - pozitiv. În a doua eprubetă din toate rândurile (proba martor cu soluție salină) reacția ar trebui să fie negativă.

De exemplu, dacă extractul studiat s-a dovedit a fi preparat din carne de cal, atunci rezultatul reacției din toate eprubetele ar trebui să fie după cum urmează (Tabelul 14).