เทคนิคของกล้องจุลทรรศน์การเตรียมการย้อมสีคืออะไร การปรับปรุงกล้องจุลทรรศน์และการพัฒนาเทคโนโลยีกล้องจุลทรรศน์เมื่อต้นศตวรรษที่ 20 การตรวจหาไบโอโพลิเมอร์ในวัตถุทางชีววิทยา

ทำความคุ้นเคยกับกล้องจุลทรรศน์ละเลง

กล้องจุลทรรศน์ใช้ในการศึกษาสัณฐานวิทยาของจุลินทรีย์ กล้องจุลทรรศน์ชีวภาพ (รูปที่ 1) คือ เครื่องมือทางแสงขยายวัตถุได้ 1,000-15,000 เท่าและประกอบด้วยระบบกลไกออปติกและระบบแสงสว่าง

ระบบกลไกประกอบด้วยขารูปเกือกม้าตัวยึดท่อท่อสเตจสกรู ระบบออปติคัลประกอบด้วยวัตถุประสงค์และช่องมองภาพ ระบบแสงสว่างประกอบด้วยคอนเดนเซอร์พร้อมไดอะแฟรมและกระจก

ตัวยึดท่อและฐานรูปเกือกม้า (ขา) เชื่อมต่อกันได้ด้วยบานพับ หลอด - กล้องโทรทรรศน์ กล้องจุลทรรศน์. ช่องมองภาพถูกใส่เข้าไปในส่วนบนของท่อและปืนพกหมุนรอบแกนของมันซึ่งจะทำให้วัตถุประสงค์ถูกขันเข้าไปในส่วนล่าง ท่อถูกเลื่อนขึ้นและลงโดยใช้สกรูแมคโครเมตริกและไมโครเมตริก การหมุนหนึ่งครั้งของสกรูไมโครมิเตอร์จะเคลื่อนท่อ 0.1 มม. ดังนั้นจึงใช้ไมโครสกรูเพื่อการเล็งที่แม่นยำยิ่งขึ้นและสำหรับสกรูเบื้องต้น - มาโครสกรู ตารางหัวเรื่องออกแบบมาเพื่อรองรับวัสดุทดสอบ โต๊ะสามารถเคลื่อนย้ายไปในทิศทางต่างๆได้โดยใช้สกรู

คอนเดนเซอร์ประกอบด้วยเลนส์ที่รวบรวมรังสีที่สะท้อนจากกระจกให้เป็นลำแสงที่มีความแรงและส่งผ่านช่องเปิดของพื้นที่ไปยังชิ้นงานทดสอบ เมื่อพิจารณาความคล่องตัวของการเตรียมการที่ไม่มีคราบควรลดคอนเดนเซอร์ลงเล็กน้อย

ไดอะแฟรมตั้งอยู่ระหว่างกระจกและคอนเดนเซอร์และทำหน้าที่ควบคุมปริมาณแสงที่เข้าสู่คอนเดนเซอร์

เลนส์ประกอบด้วยระบบของเลนส์ที่อยู่ในกรอบโลหะ เลนส์ด้านหน้าใช้เพื่อขยายวัตถุส่วนที่เหลือ - เพื่อแก้ไขภาพ เลนส์ให้ภาพเหมือนจริงขยายและย้อนกลับ

กล้องจุลทรรศน์ชีวภาพสมัยใหม่มีวัตถุประสงค์อย่างน้อยสามประการ เลนส์แห้งกำลังขยาย 8 และ 40 เท่า (มีชั้นอากาศระหว่างเลนส์และส่วนเตรียม) เลนส์แช่ - 90 เท่า กระบอกเลนส์แต่ละอันจะมีตัวเลขที่ระบุกำลังขยาย สำหรับการเตรียมการย้อมด้วยกล้องจุลทรรศน์จะใช้วัตถุประสงค์ในการแช่โดยจุ่มเลนส์ด้านหน้าลงในหยดน้ำมันซีดาร์ลงบนสไลด์กระจกที่มีแบคทีเรียเปื้อน ด้วยเหตุนี้รังสีทั้งหมดจากไฟส่องสว่างโดยไม่เปลี่ยนทิศทางจึงตกเข้าไปในเลนส์และได้ภาพที่ชัดเจน

เลนส์ตาประกอบด้วยเลนส์ตาบนและเลนส์เก็บส่วนล่าง มีตัวเลขที่ด้านบนของช่องมองภาพระบุกำลังขยาย (7, 10, 15) เลนส์ใกล้ตาจะขยายภาพเท่านั้น กำลังขยายทั้งหมดของกล้องจุลทรรศน์คือผลคูณของการขยายตามวัตถุประสงค์เท่าของการขยายเลนส์ตา

หลักการทำงานของกล้องจุลทรรศน์เรืองแสงขึ้นอยู่กับความสามารถของวัตถุแต่ละชิ้นและสีย้อมในการเรืองแสงเมื่อส่องสว่างด้วยรังสีอัลตราไวโอเลต กล้องจุลทรรศน์เรืองแสงมีแหล่งกำเนิดแสงอัลตราไวโอเลตและชุดกรองแสง ในแบคทีเรียการเรืองแสงของตัวเองแสดงออกได้ไม่ดีมาก ดังนั้นจึงจำเป็นต้องรักษาด้วยสีเรืองแสง (ฟลูออโรโครเมส) ซึ่งย้อมองค์ประกอบโครงสร้างของเซลล์ด้วยสีที่ต่างกัน

หลักการทำงานของกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนขึ้นอยู่กับการใช้กระแสของอิเล็กตรอนแทนการแผ่รังสีแสงซึ่งได้รับจากปืนอิเล็กตรอน เลนส์ออปติคัลทั้งหมดจะถูกแทนที่ด้วยขดลวดแม่เหล็กไฟฟ้าซึ่งสร้างสนามแม่เหล็กไฟฟ้าที่ควบคุมการเคลื่อนที่ของอิเล็กตรอน กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนขยายวัตถุ 50-200 พันเท่า การเตรียมการสำหรับการวิจัยจัดทำขึ้นเกี่ยวกับฟิล์มบาง ๆ ของ collodion วัตถุที่อยู่ระหว่างการศึกษาวางอยู่ในเส้นทางการไหลของอิเล็กตรอนซึ่งสะท้อนบนหน้าจอเรืองแสง สามารถถ่ายภาพวัตถุด้วยอุปกรณ์ที่ติดตั้งไว้ในกล้องจุลทรรศน์ ด้วยกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนคุณสามารถศึกษารายละเอียดโครงสร้างของแบคทีเรียไวรัสและแบคเทอริโอเฟจได้

ขอแนะนำให้วางโต๊ะทำงานเพื่อเตรียมกล้องจุลทรรศน์ไว้ข้างหน้าต่าง กล้องจุลทรรศน์วางอยู่บนโต๊ะทำงานโดยให้ที่ยึดท่อหันเข้าหาตัวเองประมาณ 7-10 ซม. จากขอบ ขั้นแรกให้ปรับแสงซึ่งลำแสงพุ่งจากแหล่งกำเนิดแสงไปยังเลนส์ด้วยกำลังขยาย 8 เท่าด้วยกระจก

ด้วยการตั้งค่าการส่องสว่างที่ถูกต้องมุมมองของกล้องจุลทรรศน์ควรอยู่ในรูปแบบของวงกลมที่ส่องสว่างอย่างสม่ำเสมอ หลังจากนั้นการเตรียมการทดสอบจะถูกวางไว้บนเวทีซึ่งได้รับการแก้ไขด้วยที่หนีบและตรวจสอบภายใต้กล้องจุลทรรศน์โดยใช้วัตถุประสงค์ที่มีกำลังขยาย 8, 40 หรือ 90 เท่า

เมื่อทำงานกับวัตถุประสงค์ที่ 8 และ 40 หลอดกล้องจุลทรรศน์จะถูกลดระดับลงอย่างระมัดระวังโดยใช้สกรูแมคโครเมตริกวัตถุประสงค์จะถูกนำเข้าใกล้ชิ้นงานมากขึ้น แต่ไม่ได้สัมผัส สังเกตผ่านช่องมองภาพโดยยกท่อขึ้นเล็กน้อยด้วยสกรูตัวเดียวกันจนกว่าจะได้ภาพ ด้วยความช่วยเหลือของสกรูไมโครเมตริกวัตถุประสงค์จะถูกกำหนดอย่างแม่นยำจนกว่าจะได้ภาพที่ชัดเจนของวัตถุ

เมื่อทำงานกับเลนส์แช่ (กำลังขยาย 90 เท่า) หยดน้ำมันแช่จะถูกนำไปใช้ในการเตรียมล่วงหน้าจากนั้นภายใต้การควบคุมของดวงตาเลนส์จะถูกลดระดับลงในหยดน้ำมันด้วยสกรูแมคโครเมตริก การตั้งค่าที่แน่นอนของการเตรียมในจุดเน้นของวัตถุประสงค์จะดำเนินการโดยใช้สกรูไมโครมิเตอร์ซึ่งสามารถหมุนได้ครึ่งรอบ

เมื่อสิ้นสุดการทำงานวัสดุทดสอบจะถูกนำออกจากเวที นำน้ำมันแช่ออกจากเลนส์ด้วยผ้านุ่ม ๆ จุ่มแอลกอฮอล์หรืออีเธอร์ลดคอนเดนเซอร์ลงเล็กน้อยติดตั้งเลนส์และใส่กล้องจุลทรรศน์ไว้ในเคสหรือเก็บไว้ใต้ฝาแก้วเพื่อป้องกันฝุ่นและความชื้น

สถาบันการศึกษา

ห้องปฏิบัติการหมายเลข 1

ตรวจสอบแล้ว
ครูอาวุโส
____________ Titenkova N. I.
"__" _________ 2554

ดำเนินการ
นักเรียนกลุ่ม TET-101
____________ Lobkova M. Yu.
"__" _________ 2554

Mogilev 2011
กระทรวงศึกษาธิการแห่งสาธารณรัฐเบลารุส
สถาบันการศึกษา
มหาวิทยาลัยอาหารของรัฐ MOGILEV

ฝ่ายเทคโนโลยีการผลิตอาหาร

ห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยา. เทคนิคกล้องจุลทรรศน์และกล้องจุลทรรศน์

ห้องปฏิบัติการหมายเลข 1

ความชำนาญพิเศษ 1-25010901 "Commodity Science and Expertise of Food Products"

ตรวจสอบแล้ว
ครูอาวุโส
____________ Titenkova N. I.
"__" _________ 2554

ดำเนินการ
นักเรียนกลุ่ม TET-101
____________ Shevtsova E. N.
"__" _________ 2554

Mogilev 2011
งานห้องปฏิบัติการครั้งที่ 1.

ห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยา. เทคนิคกล้องจุลทรรศน์และกล้องจุลทรรศน์

วัตถุประสงค์: การสร้างความคุ้นเคยของนักเรียนด้วยวัตถุประสงค์โครงสร้างอุปกรณ์และโหมดการทำงานของห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยา การเรียนรู้เทคนิคการใช้กล้องจุลทรรศน์ของการเตรียมทางจุลชีววิทยา

คำถามทดสอบ:

วัตถุประสงค์ของห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยาโครงสร้างและอุปกรณ์

อุปกรณ์ห้องปฏิบัติการทางจุลชีววิทยา
การวิจัยทางจุลชีววิทยาดำเนินการในห้องพิเศษที่เรียกว่าห้องปฏิบัติการทางจุลชีววิทยา ห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยาประกอบด้วยห้องต่างๆ:
1 - ห้องปฏิบัติการสำหรับการวิจัย
2 - ห้องสำหรับเตรียมสารอาหาร
3 - ห้องล้างจาน (ห้องซักผ้า);
4 - ห้องสำหรับฆ่าเชื้อจานอาหารเลี้ยงเชื้อ
(ฆ่าเชื้อ);
5 - กล่อง - ห้องแยกสำหรับการทำงานที่ต้องการระดับความเป็นหมันที่เพิ่มขึ้น สำหรับสิ่งนี้ก่อนทำงานอากาศและวัตถุอื่น ๆ จะถูกฆ่าเชื้อ
อุปกรณ์ ห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยา
อุปกรณ์ของห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยาประกอบด้วยอุปกรณ์เกี่ยวกับแสง (กล้องจุลทรรศน์แว่นขยาย) อุปกรณ์ระบายความร้อน (เทอร์โมสตัทหม้อนึ่งไฟฟ้าอุปกรณ์ Koch เตาอบแห้งตู้เย็นจุลชีววิทยา (เข็มแบคทีเรียลูป spatulas) และเครื่องมือผ่าตัด (มีดผ่าตัดแหนบที่จับกรรไกร) เช่นเดียวกับหลอดทดลอง, จานเพาะเชื้อ, ฝาปิดและสไลด์แก้ว, หลอดแก้ว, หลอดหยดที่มีสีย้อมห้องปฏิบัติการต้องการให้มีสารอาหาร (วุ้นสารอาหารแห้ง, อาหารของเคสเลอร์, ตัวกลางของเอนโด), วุ้น - วุ้น, เจลาติน, สีวิเคราะห์ (ฟูซิน, เจนเถียนไวโอเลต, เมทิลีนบลูเมทิลีนบลู) กรดต่าง ๆ ด่างโซดา

รูปที่ 1 - เครื่องแก้วจุลชีววิทยา: a - จานเพาะเชื้อ; b - แก้วตัวอย่าง; c - ฝาแก้ว d - เข็มจุลชีววิทยา d - วงจุลชีววิทยา e - ไม้พายของ Drygalsky

ควรมีอุปกรณ์อย่างไร สถานที่ทำงาน นักจุลชีววิทยา?

นักเรียนแต่ละคนต้องมีสถานที่ทำงานถาวรในห้องปฏิบัติการ สถานที่ทำงานควรติดตั้งกล้องจุลทรรศน์ขาตั้งหลอดทดลองเข็มและห่วงแบคทีเรียไม้พาย Drygalski ปิเปตชุดฝาปิดและสไลด์ชิ้นงานขวดล้างด้วยน้ำตะเกียงแอลกอฮอล์ไม้ขีดไฟถ้วยพร้อมสะพานชุดสีย้อมกระดาษกรองนาฬิกาทรายและภาชนะที่มี น้ำยาฆ่าเชื้อ

การวิจัยทางจุลชีววิทยามีวิธีการใดบ้างและใช้วิธีใดในการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาของอาหาร

มีการใช้วิธีการเฉพาะหลายวิธีในการศึกษาจุลินทรีย์ การวิจัยทางจุลชีววิทยาประเภทหลัก ได้แก่ :
- bacterioscopic (กล้องจุลทรรศน์) - การศึกษาด้วยกล้องจุลทรรศน์เกี่ยวกับรูปร่างและโครงสร้างของจุลินทรีย์
- แบคทีเรียวิทยา - การศึกษาวัฒนธรรมของจุลินทรีย์โดยการเพาะปลูกเช่น การเจริญเติบโตบนสื่อสารอาหารเทียม
- การทดลอง - การตรวจหาจุลินทรีย์และพิษของพวกมันโดยการติดเชื้อจากสัตว์ทดลอง (หนูหนูขาวหนูตะเภา) กับพวกมัน ส่วนใหญ่มักใช้เพื่อระบุสาเหตุของอาหารเป็นพิษ
- ซีรั่ม - การตรวจหาจุลินทรีย์โดยใช้ซีรั่มในเลือดที่มีแอนติบอดี วิธีนี้ใช้กันอย่างแพร่หลายในจุลชีววิทยาทางการแพทย์
ในการวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาของอาหารจะใช้การวิจัยสองประเภทแรก วิธีการวิจัยแบคทีเรียกำหนดลักษณะทางวัฒนธรรม (ขนาดรูปร่างโครงสร้างสีความมันวาวโปรไฟล์ของแต่ละอาณานิคม) และลักษณะทางชีวเคมีของจุลินทรีย์ (ความสามารถในการหมักสารที่เป็นส่วนหนึ่งของสารอาหารต่างๆ) ในระหว่างการตรวจสอบแบคทีเรียจะมีการกำหนดลักษณะทางสัณฐานวิทยา (ขนาดรูปร่าง ฯลฯ ) ของจุลินทรีย์แต่ละชนิดและความสามารถในการย้อมสีด้วยสีต่างๆ (คุณสมบัติของสารเคลือบสี) เนื่องจากมีจุลินทรีย์แฝดจำนวนมากในธรรมชาติมีลักษณะคล้ายกันดังนั้นในการระบุชนิดของจุลินทรีย์การทำสำเนาแบคทีเรียเพียงครั้งเดียวจึงไม่เพียงพอจึงจำเป็นต้องใช้วิธีการวิจัยทางแบคทีเรีย

กฎสำหรับการทำงานในห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยาคืออะไร?

การทำงานในห้องปฏิบัติการทางจุลชีววิทยาต้องดำเนินการภายใต้สภาวะปลอดเชื้อซึ่งเป็นกฎความปลอดภัยขั้นพื้นฐาน ประสิทธิภาพของงานทางจุลชีววิทยาภายใต้สภาวะปลอดเชื้อควรให้แน่ใจว่ามีการป้องกันทั้งการปนเปื้อนของสภาพแวดล้อมภายนอกและบุคลากรที่ทำงานด้วยจุลินทรีย์จากวัสดุทดสอบและวัฒนธรรมบริสุทธิ์ที่ถูกขับออกมากโดยจุลินทรีย์ภายนอกจากสิ่งแวดล้อม
เมื่อทำงานในห้องปฏิบัติการทางจุลชีววิทยาควรปฏิบัติตามกฎต่อไปนี้:
ก) อยู่ในห้องปฏิบัติการและทำงานในชุดคลุม
b) ใช้สถานที่ทำงานถาวร
c) รักษาความสงบเรียบร้อยในที่ทำงานอย่าเก็บสิ่งแปลกปลอมไว้บนนั้น
d) แหนบ, spatulas, ลูปและเข็มจุลชีววิทยา, ปิเปต, หลังจากทำงานกับจุลินทรีย์แล้วให้เผาในเปลวไฟของตะเกียงแอลกอฮอล์หรือจุ่มลงในภาชนะที่มีสารละลายฆ่าเชื้อ (คลอรามีน, disol, กรดคาร์โบลิก)
e) วัสดุที่ใช้แล้วทั้งหมดที่มีจุลินทรีย์ - การเตรียมที่ใช้แล้วจากวัฒนธรรมที่มีชีวิตการเตรียมชั่วคราว ฯลฯ - ก่อนอื่นต้องทำให้ไม่เป็นอันตรายโดยการฆ่าเชื้อหรือการฆ่าเชื้อโรคแล้วจึงล้างเท่านั้น
f) เมื่อสิ้นสุดชั้นเรียนทำความสะอาดสถานที่ทำงานถอดเสื้อคลุมและหลังจากนั้นให้ล้างมือให้สะอาด
ในห้องปฏิบัติการ ห้าม:
ก) สวมผ้าโพกศีรษะและเสื้อนอก
b) ทำงานโดยไม่มีชุดคลุม;
c) กินดื่มน้ำสูบบุหรี่
d) วางวัตถุแปลกปลอมบนโต๊ะ
จ) สัมผัสใบหน้าด้วยมือที่ไม่ได้อาบน้ำ
f) หลีกเลี่ยงการเดินโดยไม่จำเป็นการเคลื่อนไหวอย่างกะทันหันร่างที่นำไปสู่การปนเปื้อนของวัสดุทดสอบด้วยจุลินทรีย์แปลกปลอม
5) อธิบายการออกแบบกล้องจุลทรรศน์แบบแช่ชีวภาพ
ขนาดของจุลินทรีย์ส่วนใหญ่วัดเป็นไมครอนหรือไมโครมิเตอร์ (1 μm \u003d 1เหรอ? 10 -6 และ \u003d 1? 10-3 มม.) ดังนั้นจึงสามารถดูและศึกษาได้ด้วยความช่วยเหลือของเครื่องมือออปติกพิเศษ - กล้องจุลทรรศน์
หลักการทำงานของกล้องจุลทรรศน์แบบแช่ทางชีวภาพคือการได้ภาพย้อนกลับที่แท้จริงของวัตถุในแสงที่ส่งผ่านหรือแสงประดิษฐ์
สามส่วนมีความโดดเด่นในกล้องจุลทรรศน์ - เครื่องกลแสงและแสง (ดูรูปที่ 1)
ชิ้นส่วนเชิงกลหรือขาตั้งกล้องประกอบด้วยส่วนรองรับ - ฐานของกล้องจุลทรรศน์ 1 และที่ยึดท่อ 2 ซึ่งระยะที่ 3, ตัวยึดคอนเดนเซอร์ 4 และกระจก (หรือไฟส่องสว่าง) 5 ได้รับการแก้ไขและในส่วนบนมีส่วนหัว 6, ท่อเอียง 7 และปืนพก 8 ด้วยเลนส์
ตารางวัตถุทำหน้าที่ในการแก้ไขวัตถุ (การเตรียม) ที่เป็นปัญหาซึ่งสามารถเคลื่อนย้ายได้ในแนวระนาบโดยใช้สกรู 9

รูปที่ 2- กล้องจุลทรรศน์ "Biolam R 1U4.2"

การโฟกัสของการเตรียมทำได้โดยการเคลื่อนท่อโดยใช้กลไกที่ขับเคลื่อนด้วยสกรูสองตัว - มาโคร 10 (โฟกัสหยาบ) และไมโครเมตริก 11 (การโฟกัสแบบละเอียด) สกรูไมโครมิเตอร์หมุนหนึ่งรอบทำให้ท่อ 0.1 มม. เมื่อไขสกรูตามเข็มนาฬิกาหลอดของกล้องจุลทรรศน์จะลดระดับลงเมื่อหมุนทวนเข็มนาฬิกาก็จะเพิ่มขึ้น
โปรดทราบ! สกรูไมโครมิเตอร์เป็นหนึ่งในชิ้นส่วนที่เปราะบางที่สุดของกล้องจุลทรรศน์และต้องใช้ความระมัดระวังมากที่สุด!
ส่วนออปติคอลของกล้องจุลทรรศน์แสดงโดยวัตถุประสงค์ 12 และช่องมองภาพ 13
วัตถุประสงค์คือตัวหลักของกล้องจุลทรรศน์ ประกอบด้วยระบบเลนส์ที่อยู่ในกรอบโลหะ การขยายเลนส์ขึ้นอยู่กับความยาวโฟกัสของเลนส์ด้านหน้า (ด้านหน้า) ซึ่งเป็นเลนส์เดียวที่ขยาย ยิ่งความโค้งของเลนส์ชิ้นหน้ามากเท่าใดทางยาวโฟกัสก็จะยิ่งสั้นลงและกำลังขยายเลนส์ก็จะยิ่งมากขึ้นเท่านั้น เลนส์สหสัมพันธ์ที่อยู่ด้านบนออกแบบมาเพื่อให้ได้ภาพที่ชัดเจนยิ่งขึ้น (ขจัดข้อบกพร่องของภาพ - ความคลาดทรงกลมและสี) กำลังขยายที่เลนส์ให้จะระบุด้วยตัวเลขบนเฟรม
ขึ้นอยู่กับระดับการขยายที่กำหนดเลนส์จะแบ่งออกเป็นเลนส์ที่มีกำลังขยายขนาดเล็กปานกลางและสูง
6) กำลังขยายโดยรวมของกล้องจุลทรรศน์กำหนดได้อย่างไร?
กำลังขยายทั้งหมดของกล้องจุลทรรศน์จะพิจารณาจากผลคูณของการขยายวัตถุประสงค์คูณกำลังขยายช่องมองภาพ ตัวอย่างเช่นหากวัตถุประสงค์คือ 90 x และช่องมองภาพคือ 15 x กำลังขยายรวมคือ 1350 x
อุปกรณ์ส่องสว่างตั้งอยู่ใต้เวที วัตถุประสงค์คือเพื่อให้ความสว่างในมุมมองของยาเสพติด ในอุปกรณ์ส่องสว่างกระจกหรือไฟส่องสว่างและคอนเดนเซอร์ที่มีไดอะแฟรมม่านตา 14 มีความโดดเด่น
คอนเดนเซอร์เป็นระบบเลนส์ที่แข็งแรงและทำหน้าที่เพิ่มความสว่างของการส่องสว่างของวัตถุที่กำลังพิจารณา มันรวบรวมรังสีแสงที่สะท้อนจากกระจกเป็นลำแสงและมุ่งเน้นไปที่ระนาบของการเตรียม คอนเดนเซอร์ถูกเคลื่อนในแนวตั้งด้วยสกรู 15 เมื่อคอนเดนเซอร์ลดระดับลงมุมมองของกล้องจุลทรรศน์จะมืดลงเมื่อยกขึ้นจะสว่างขึ้น
ไดอะแฟรมม่านตาตั้งอยู่ใต้คอนเดนเซอร์ ประกอบด้วยส่วนโลหะบาง ๆ ที่สามารถเคลื่อนย้ายหรือขยายได้โดยใช้คันโยกเพื่อควบคุมการไหลของแสงเข้าสู่คอนเดนเซอร์
7) เลนส์แบบแห้งและแบบแช่คืออะไร?
วัตถุประสงค์ในการขยายต่ำ (3 x, 5 x, 8 x, 9 x, 10 x) ส่วนใหญ่จะใช้สำหรับการตรวจสอบเบื้องต้นของการเตรียม วัตถุประสงค์ของการขยายขนาดกลาง (20 x, 40 x, \u200b\u200b60 x) - เพื่อศึกษาเซลล์ขนาดใหญ่ของจุลินทรีย์ (เช่นเชื้อรา) เลนส์เหล่านี้เรียกว่าเลนส์แห้งเนื่องจากมีอากาศระหว่างเลนส์ส่วนหน้าและชิ้นงานระหว่างกล้องจุลทรรศน์ เนื่องจากความแตกต่างของดัชนีหักเหของอากาศ (n \u003d 1) และแก้ว (n \u003d 1.52) รังสีบางส่วนที่ส่องแสงเตรียมการจึงกระจัดกระจายและไม่เข้าสู่เลนส์
วัตถุประสงค์ของการขยายสูง (85 x, 90 x) เรียกว่าเลนส์แช่ ใช้เพื่อศึกษาจุลินทรีย์ในรูปแบบเล็ก ๆ (เช่นแบคทีเรีย) เมื่อทำงานร่วมกับพวกเขาการเตรียมการควรสว่างที่สุดเท่าที่จะทำได้ การกระเจิงของแสงซึ่งเป็นสิ่งที่หลีกเลี่ยงไม่ได้เมื่อทำงานกับเลนส์จะถูกกำจัดในกรณีนี้โดยการใช้ของเหลวที่แช่ซึ่งมีดัชนีการหักเหของแสงใกล้เคียงกับแก้ว มักใช้น้ำมันถั่วซีดาร์ซึ่ง n \u003d 1.515 หยดของเหลวถูกนำไปใช้กับการเตรียมและเลนส์จะถูกแช่อยู่ในนั้น ทางยาวโฟกัสสั้นของเลนส์กำลังขยายสูง ((1.9 - 2.1) มม.) ช่วยให้คุณตรวจสอบวัตถุโดยไม่ต้องยกเลนส์ขึ้นจากที่ตกอันเป็นผลมาจากการสร้างสื่อที่เป็นเนื้อเดียวกันระหว่างเลนส์และชิ้นงาน
เลนส์ใกล้ตาประกอบด้วยเลนส์สองชิ้นที่อยู่ในกรอบโลหะทั่วไป เลนส์ด้านบนเรียกว่าเลนส์ตาส่วนล่างเรียกว่าเลนส์รวม เลนส์ใกล้ตาจะขยายภาพที่เกิดจากเลนส์เท่านั้น กล้องจุลทรรศน์ของระบบ "Biolam" ติดตั้งช่องมองภาพที่มีกำลังขยาย 7 x, 10 x และ 15 x (ตัวเลขระบุไว้บนเฟรม)
8) แนวคิดเรื่อง "ความละเอียด" ของกล้องจุลทรรศน์หมายถึงอะไร? ความละเอียดของกล้องจุลทรรศน์ Biolam คืออะไร?
ลักษณะทางเทคนิคหลักของกล้องจุลทรรศน์คือความละเอียดเช่น ระยะห่างต่ำสุดระหว่างจุดสองจุดของวัตถุที่อยู่ระหว่างการพิจารณาซึ่งไม่รวมเข้าเป็นหนึ่งเดียวและมองเห็นวัตถุได้ชัดเจน ในทางปฏิบัติในห้องปฏิบัติการสิ่งที่ใช้กันอย่างแพร่หลายคือกล้องจุลทรรศน์แบบจุ่มทางชีวภาพของซีรีส์ Biolam ซึ่งทำให้สามารถขยายวัตถุได้ถึง 1800 เท่า ความละเอียดที่ จำกัด คือ 0.21 ไมครอนดังนั้นเมื่อใช้กล้องจุลทรรศน์เหล่านี้จะสามารถดูวัตถุที่มีขนาดอย่างน้อย 0.21 ไมครอนได้
9) อะไรคือกฎสำหรับการเตรียมด้วยกล้องจุลทรรศน์?
กล้องจุลทรรศน์ของการเตรียมการเริ่มต้นด้วยการติดตั้งแสงเสมอ เมื่อทำงานในเวลากลางวันพวกเขาใช้แสงธรรมชาติ แต่บ่อยครั้งที่พวกเขาหันไปใช้แหล่งกำเนิดแสงประดิษฐ์ที่ให้แสงที่ปรับได้ (ไฟส่องสว่าง OI-19, OI-35)
เมื่อติดตั้งไฟต้องยกคอนเดนเซอร์ขึ้นจนสุดไดอะแฟรมม่านตาเปิดอยู่ แสงจะถูกปรับด้วยเลนส์กำลังขยายต่ำ (8x) ลดระดับลงเหลือระยะประมาณ 0.5 ซม. จากเวทีจากนั้นเมื่อมองผ่านช่องมองภาพและหมุนกระจกก็จะได้แสงสว่างที่สว่างสม่ำเสมอทั้งมุมมอง
สิ่งที่เตรียมไว้วางบนเวทีและเสริมด้วยที่หนีบ กล้องจุลทรรศน์เริ่มต้นด้วยภาพรวมของชิ้นงานที่กำลังขยายต่ำ ในขณะเดียวกันการสังเกตจากด้านข้างวัตถุประสงค์จะลดลงโดยใช้สกรูแมคโครเมตริกที่ระยะประมาณ 1 ซม. จากเวที มองผ่านช่องมองภาพและค่อยๆหมุนสกรูมาโครสโคปิกยกท่อขึ้นจนกระทั่งโครงร่างที่ชัดเจนของการเตรียมปรากฏขึ้น สำหรับการโฟกัสที่แม่นยำจะใช้สกรูไมโครมิเตอร์ซึ่งหมุนได้ไม่เกินหนึ่งในสี่ของรอบ ในขั้นตอนนี้ในการศึกษาแบคทีเรียมีความเป็นไปได้โดยการเคลื่อนตัวอย่างช้าๆบนเวทีเพื่อค้นหามุมมองที่เหมาะสมที่สุดสำหรับกล้องจุลทรรศน์: พื้นที่ของตัวอย่างซึ่งมีจุลินทรีย์อยู่ในปริมาณที่เพียงพอสำหรับการดูจะถูกจัดเรียงเป็นชั้นเดียวเท่า ๆ กัน
ในกล้องจุลทรรศน์กำลังขยายขนาดกลางให้แทนที่วัตถุประสงค์การขยายต่ำด้วยวัตถุประสงค์ 40x หรือ 60x ตำแหน่งกึ่งกลางของเลนส์จะแสดงโดยการคลิกของตัวยึดภายในปืนพก เมื่อมองผ่านช่องมองภาพท่อจะถูกยกขึ้นอย่างช้าๆจนกระทั่งภาพปรากฏขึ้นและโฟกัสจะถูกปรับให้ละเอียดด้วยสกรูไมโครมิเตอร์
กล้องจุลทรรศน์ที่กำลังขยายสูง (วัตถุประสงค์ 90 x) ดำเนินการโดยใช้น้ำมันแช่ซึ่งหยดลงบนชิ้นงานทดสอบ จากนั้นเลนส์แบบแห้งจะถูกแทนที่ด้วยเลนส์แช่ภายใต้การควบคุมสายตา (มุมมองด้านข้าง) โดยจุ่มลงในน้ำมันเกือบจนเลนส์ส่วนหน้าสัมผัสกับสไลด์ มองเข้าไปในช่องมองภาพให้ยกท่อขึ้นเล็กน้อยด้วยสกรูแมคโครเมตริกจนกระทั่งภาพของชิ้นงานปรากฏขึ้นจากนั้นใช้สกรูขนาดเล็กเพื่อให้ได้โฟกัส
ในตอนท้ายของการทำงานท่อจะถูกยกขึ้นการเตรียมจะถูกลบออกจากขั้นตอนคอนเดนเซอร์จะลดลงและน้ำมันจะถูกลบออกจากเลนส์ด้านหน้าของวัตถุประสงค์ในการแช่ด้วยผ้าเช็ดปากฝ้ายแห้งอย่างระมัดระวัง น้ำมันที่เหลืออยู่อาจทำให้เลนส์เสียหายและทำให้ภาพขนาดเล็กลดลง
ข้อผิดพลาดต่อไปนี้อาจเกิดขึ้นได้ในระหว่างการใช้กล้องจุลทรรศน์:
- การส่องสว่างที่ไม่สมบูรณ์ของมุมมองเนื่องจากตำแหน่งของกระจกไม่ถูกต้องหรือตำแหน่งที่ไม่ถูกต้องของวัตถุประสงค์ (ย้ายไปบนปืนพกกล้องจุลทรรศน์จนกว่าจะคลิก)
- ไฟส่องสว่างสลัวของมุมมองที่มีตำแหน่งกระจกไม่ถูกต้องด้วยคอนเดนเซอร์ที่ลดลงหรือไดอะแฟรมปิดและน้ำมันแช่ในปริมาณที่ไม่เพียงพอในการเตรียม
- ภาพของตัวแบบขาดความคมชัด - ยาไม่อยู่ในโฟกัส

เอาท์พุต: เราได้ทำความคุ้นเคยกับวัตถุประสงค์อุปกรณ์อุปกรณ์และโหมดการทำงานของห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยา เชี่ยวชาญเทคนิคการใช้กล้องจุลทรรศน์ของการเตรียมทางจุลชีววิทยา

กระทรวงศึกษาธิการแห่งสาธารณรัฐเบลารุส
สถาบันการศึกษา
มหาวิทยาลัยอาหารของรัฐ MOGILEV

ฝ่ายเทคโนโลยีการผลิตอาหาร

ห้องปฏิบัติการหมายเลข 2

ความชำนาญพิเศษ 1-25010901 "Commodity Science and Expertise of Food Products"

ตรวจสอบแล้ว
ครูอาวุโส
____________ Titenkova N. I.
"__" _________ 2554

ดำเนินการ
นักเรียนกลุ่ม TET-101
____________ Lobkova M. Yu.
"__" _________ 2554

Mogilev 2011
กระทรวงศึกษาธิการแห่งสาธารณรัฐเบลารุส
สถาบันการศึกษา
มหาวิทยาลัยอาหารของรัฐ MOGILEV

ฝ่ายเทคโนโลยีการผลิตอาหาร

ศึกษาสัณฐานวิทยาของแบคทีเรียที่พบในอาหาร
อุตสาหกรรม. กฎสำหรับการทำงานกับวัฒนธรรมของจุลินทรีย์

ห้องปฏิบัติการหมายเลข 2

ความชำนาญพิเศษ 1-25010901 "Commodity Science and Expertise of Food Products"

ตรวจสอบแล้ว
ครูอาวุโส
____________ Titenkova N. I.
"__" _________ 2554

ดำเนินการ
นักเรียนกลุ่ม TET-101
____________ Shevtsova E. N.
"__" _________ 2554

Mogilev 2011

งานห้องปฏิบัติการครั้งที่ 2.

ศึกษาสัณฐานวิทยาของแบคทีเรียที่พบในอาหาร
อุตสาหกรรม. กฎสำหรับการทำงานกับวัฒนธรรมของจุลินทรีย์

วัตถุประสงค์: ทำความคุ้นเคยกับสัณฐานวิทยาของแบคทีเรียซึ่งมักพบในอุตสาหกรรมอาหารและวิธีการศึกษาภายใต้กล้องจุลทรรศน์ในร่างกายและการเตรียมสีแบบคงที่ ทำความคุ้นเคยกับกฎสำหรับการจัดการวัฒนธรรมของจุลินทรีย์
วัสดุและอุปกรณ์: กล้องจุลทรรศน์, สไลด์แก้วที่มีและไม่มีบ่อน้ำ, ฝาปิด, ตะเกียงวิญญาณ, สารละลายสีย้อม, จุลชีววิทยา, น้ำมันแช่, วัฒนธรรมบริสุทธิ์ของแบคทีเรีย

ส่วนปฏิบัติ
มีการเตรียมสไลด์คงที่ย้อมด้วยวิธีแกรมและตรวจสอบด้วยเลนส์แช่ คำนวณกำลังขยายทั้งหมดของกล้องจุลทรรศน์: 90 x x15 x \u003d 1350 x

เป็นผลให้เราได้รับสิ่งต่อไปนี้:

ไมโครคอคชิ, กรัม (+)
เชื้อ Staphylococci, gr (+)
แท่ง gr (+)
คำถามทดสอบ:

กฎสำหรับการทำงานกับวัฒนธรรมของจุลินทรีย์

ในชั้นเรียนในห้องปฏิบัติการเพื่อศึกษากลุ่มจุลินทรีย์ต่างๆ (แบคทีเรียเชื้อรายีสต์) นักเรียนจะทำงานร่วมกับการเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ที่บริสุทธิ์จากเซลล์เดียวหรือสปอร์บนพื้นผิวของสารอาหารต่างๆ การเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์มีทั้งในจานเพาะเชื้อหรือในหลอดทดลองที่ปิดด้วยปลั๊กสำลีซึ่งจะปกป้องวัฒนธรรมจากจุลินทรีย์จากสภาพแวดล้อมภายนอกที่เข้ามา
เมื่อเตรียมการเตรียมจุลินทรีย์เช่นเดียวกับในระหว่างการหว่านและการปลูกใหม่จำเป็นต้องปฏิบัติตามกฎและขั้นตอนการทำงานอย่างเคร่งครัด งานทั้งหมดกับวัฒนธรรมของจุลินทรีย์จะต้องดำเนินการในเปลวไฟของตะเกียงแอลกอฮอล์ จุลินทรีย์ถูกนำมาจากสารอาหารโดยมีวงจุลชีววิทยาซึ่งถูกเผาก่อน (เผา) ในเปลวไฟของตะเกียงแอลกอฮอล์
ลำดับงานควรเป็นดังนี้:
จุดตะเกียงวิญญาณ
นำท่อเพาะเชื้อมาวางให้อยู่ระหว่างนิ้วหัวแม่มือและนิ้วชี้ของมือซ้ายรองรับโดยนิ้วกลางและในตำแหน่งที่เอียง
ใช้มือขวาวนจุลชีววิทยาจุดไฟด้วยตะเกียงแอลกอฮอล์ถือไว้ในแนวตั้ง
ใช้มือขวาหนีบปลั๊กสำลีระหว่างนิ้วก้อยกับฝ่ามือให้แน่นหมุนปลั๊กด้วยการหมุนแบบหมุนถอดออกจากหลอดทดลองแล้วจับปลายลงตรวจสอบให้แน่ใจว่าไม่ได้สัมผัสกับวัตถุรอบข้าง
เผาไหม้ขอบของหลอด
ใส่ห่วงที่เย็นลงในหลอดทดลองและนำมวลจุลินทรีย์จำนวนเล็กน้อยสัมผัสกับวัฒนธรรมเบา ๆ และไม่ขูดสารอาหารที่หนาแน่นด้วยห่วง ถ้าจุลินทรีย์เติบโตในอาหารที่เป็นของเหลวของเหลวจะถูกนำมาวนเป็นวงกลม
เผาขอบของหลอดทดลองส่วนหนึ่งของปลั๊กสำลีในเปลวไฟอีกครั้งแล้วปิดหลอดด้วยปลั๊ก
วัสดุที่ถ่ายจะถูกทำให้เป็นอิมัลชันในหยดน้ำบนสไลด์และเกลี่ยให้ทั่วพื้นผิวด้วยชั้นบาง ๆ (เตรียมสเมียร์)
เผาห่วงอีกครั้งในเปลวไฟเพื่อทำลายจุลินทรีย์ที่เหลืออยู่

วิธีการเตรียมการเตรียมการสำหรับจุลชีพด้วยกล้องจุลทรรศน์ภายในช่องคลอด? ข้อดีและข้อเสียของวิธีนี้คืออะไร?

มีสองวิธีหลักในการเตรียมเชื้อจุลินทรีย์ภายในช่องคลอด ได้แก่ “ หยดแขวน” และ“ หยดบด”
1 ยา "ห้อยหล่น" หยดสารแขวนลอยของเซลล์จุลินทรีย์หยดหนึ่งถูกนำไปใช้กับกระจกครอบและวางสไลด์แก้วไว้อย่างระมัดระวังเพื่อให้หยดนั้นพอดีอย่างอิสระตรงกลางของภาวะซึมเศร้า ขอบของรูได้รับการหล่อลื่นล่วงหน้าด้วยปิโตรเลียมเจลลี่การเตรียมจะพลิกกลับและใช้กล้องจุลทรรศน์ วิธีนี้ใช้เพื่อศึกษาการเคลื่อนที่ของจุลินทรีย์เป็นหลัก
2 การเตรียม "Crushed drop" ไม่มีคราบ (เนทีฟ) หยดของเหลวถูกนำไปใช้กับสไลด์แก้ว (เมื่อทำงานกับแบคทีเรีย - น้ำประปาเมื่อทำงานกับเชื้อราด้วยกล้องจุลทรรศน์ - ส่วนผสมของเอทิลแอลกอฮอล์และกลีเซอรีนในปริมาณเท่า ๆ กัน) ใส่จุลินทรีย์สองสามตัวที่จะตรวจสอบคนและปิดด้วยกระจกปิดโดยใช้อย่างระมัดระวังตามขอบเพื่อหลีกเลี่ยง การก่อตัวของฟองอากาศ ขจัดของเหลวส่วนเกินที่รั่วออกด้วยกระดาษกรอง แบคทีเรียที่เติบโตบนอาหารที่มีสารอาหารหนาแน่นจะถูกถ่ายโอนไปยังของเหลวหนึ่งหยดโดยใช้เข็มแบคทีเรียและเชื้อราด้วยกล้องจุลทรรศน์ - โดยใช้เข็มผ่าสองอัน วัฒนธรรมที่ปลูกในของเหลวเช่นยีสต์วางบนสไลด์แก้วด้วยปิเปตที่ปราศจากเชื้อโดยไม่ต้องหยดของเหลวก่อน การเตรียมการด้วยกล้องจุลทรรศน์ด้วยวัตถุประสงค์ที่แห้ง ยานี้ช่วยให้คุณสามารถสร้างรูปร่างของเซลล์ของจุลินทรีย์ขนาดใหญ่ส่วนใหญ่ขนาดตำแหน่งการเคลื่อนย้าย
3 ยา "บดหยด" ของจุลินทรีย์ที่เปื้อนภายในช่องคลอด หยดสารละลายที่อ่อนแอ (1: 1000) ของสีย้อม (เมทิลีนบลูหรือฟูซิน) จะถูกเพิ่มลงในหยดจุลินทรีย์บนสไลด์แก้วคนให้เข้ากันแล้วปิดด้วยแก้ว
ฯลฯ .................

คำแนะนำ

สู่การปฏิบัติในห้องปฏิบัติการเกี่ยวกับวินัย "ชีววิทยาทั่วไปและจุลชีววิทยา" สำหรับนักเรียนในทิศทาง 240700.62 "เทคโนโลยีชีวภาพ"

มอสโก 2013

บทนำ

คำแนะนำที่เป็นระเบียบมีไว้สำหรับนักเรียนที่เรียนในทิศทาง 240700.62 "เทคโนโลยีชีวภาพ" และมีหัวข้อของการศึกษาในห้องปฏิบัติการซึ่งมีวัตถุประสงค์เพื่อปลูกฝังให้นักเรียนมีทักษะในการทำงานในห้องปฏิบัติการกับจุลินทรีย์เพื่อศึกษาลักษณะทางสัณฐานวิทยาและคุณสมบัติทางสรีรวิทยาของพวกเขาเพื่อฝึกฝนวิธีการทำงานทางจุลชีววิทยา วัฒนธรรมบริสุทธิ์ของจุลินทรีย์ - ผู้ผลิตสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพถูกใช้เป็นเป้าหมายในการวิจัยในระหว่างการทำงาน

วัตถุประสงค์ของแนวทางคือ:

ความคุ้นเคยของนักเรียนกับอุปกรณ์ของห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยาและวิธีการฆ่าเชื้ออาหารเลี้ยงเชื้ออาหารสินค้าคงคลัง

นักเรียนที่เชี่ยวชาญเทคนิคการแยกวัฒนธรรมบริสุทธิ์

การศึกษาลักษณะทางสัณฐานวิทยาและวัฒนธรรมของกลุ่มจุลินทรีย์ที่สำคัญที่สุดโดยนักเรียน

การเรียนรู้โดยนักศึกษาวิธีการบัญชีเชิงปริมาณของจุลินทรีย์รวมทั้งในอาหาร

กฎการทำงานเมื่อทำการประชุมเชิงปฏิบัติการทางจุลชีววิทยา ข้อควรระวังเพื่อความปลอดภัยในห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยา

ห้ามเข้าห้องปฏิบัติการ แจ๊กเก็ต และวางของใช้ส่วนตัวบนโต๊ะ ในห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยาอนุญาตให้ทำงานเฉพาะในชุดที่ป้องกันเสื้อผ้าจากการปนเปื้อนของจุลินทรีย์และป้องกันการแพร่กระจายออกนอกห้องปฏิบัติการด้วย ผมจะต้องถูกตรึง

นักเรียนแต่ละคนได้รับมอบหมายงานถาวรซึ่งจะต้องได้รับการดูแลอย่างต่อเนื่อง

ในหลอดทดลองทั้งหมดต้องเขียนจานเพาะเชื้อขวดชื่อจุลินทรีย์วันที่ฉีดวัคซีนชื่อนักเรียนและหมายเลขกลุ่ม

ในระหว่างการดำเนินการลูปและเข็มของแบคทีเรียจะถูกขจัดสิ่งปนเปื้อนโดยการเผาในเปลวไฟก่อนและหลังการเก็บจุลินทรีย์ เมื่อเตรียมการเตรียมหรือทำวัฒนธรรมย่อยของจุลินทรีย์ที่เติบโตบนอาหารเหลวพวกเขาจะไม่ใช้ห่วง แต่เป็นปิเปตที่ปลายด้านบนซึ่งต้องสอดสำลีชิ้นหนึ่งเข้าไปเพื่อป้องกันการสัมผัสโดยบังเอิญของวัสดุจุลินทรีย์กับช่องปาก ปิเปตที่ใช้แล้วปิเปตจะอยู่ในแก้วพอร์ซเลนพร้อมน้ำยาฆ่าเชื้อไม้ขีดไฟกระดาษกรองการเตรียมที่ใช้แล้วจะอยู่ในเครื่องตกผลึก ห้ามวางสิ่งของเหล่านี้บนโต๊ะโดยเด็ดขาด

หากวัสดุทดสอบหรือวัฒนธรรมของจุลินทรีย์ติดมือโต๊ะเสื้อคลุมหรือรองเท้าจำเป็นต้องแจ้งให้ครูทราบเกี่ยวกับเรื่องนี้และภายใต้คำแนะนำของเขาเพื่อดำเนินการฆ่าเชื้อโรค

หลังจากจบบทเรียนสถานที่ทำงานจะถูกฆ่าเชื้อวัสดุที่ใช้แล้วและสิ่งของอื่น ๆ ไม่เป็นอันตรายล้างมือด้วยสบู่ห้องมีอากาศถ่ายเทและถ้าเป็นไปได้ให้ฆ่าเชื้อด้วยหลอด UV

อุปกรณ์กล้องจุลทรรศน์ การเตรียมการสำหรับกล้องจุลทรรศน์

กล้องจุลทรรศน์. กฎพื้นฐานของกล้องจุลทรรศน์

การศึกษาสัณฐานวิทยาและโครงสร้างของเซลล์ของจุลินทรีย์ค่าที่วัดโดยไมโครมิเตอร์นาโนเมตรอังสตรอมเป็นไปได้ด้วยความช่วยเหลือของกล้องจุลทรรศน์เท่านั้น ในสภาพห้องปฏิบัติการมักใช้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง

กล้องจุลทรรศน์มีส่วนที่เป็นกลไกและออปติก (รูปที่ 1) ส่วนเครื่องกล ประกอบด้วยขาตั้ง, เวที, ท่อป้อมปืน, สกรูมาโครและไมโครเมตริก ส่วนล่างของขาตั้งกล้องเป็นส่วนรองรับของกล้องจุลทรรศน์ส่วนบนเป็นที่ยึดท่อซึ่งสามารถเคลื่อนย้ายได้โดยใช้กลไกขับเคลื่อนโดยการหมุนของสกรูแมคโครเมตริกและไมโครเมตริกซึ่งออกแบบมาสำหรับการโฟกัสหยาบและละเอียดตามลำดับ เมื่อไขสกรูตามเข็มนาฬิกาตัวยึดหลอดของกล้องจุลทรรศน์จะลดลงเมื่อเทียบกับสกรูจะถูกยกขึ้น ในส่วนบนของตัวยึดท่อมีปืนพกหมุนรอบแกนของมัน วัตถุประสงค์ถูกขันเข้าไปในรูของแผ่นด้านล่างของปืนพก ช่องมองภาพแบบเปลี่ยนได้จะถูกใส่เข้าไปที่ปลายด้านบนของท่อ ใช้ตารางวัตถุทรงกลมหรือสี่เหลี่ยมเพื่อวางสิ่งที่เตรียมไว้มันมีรูตรงกลางสำหรับทางผ่านของรังสีที่ส่องให้เห็นสิ่งที่เตรียมไว้ โต๊ะเลื่อนสามารถเคลื่อนย้ายได้ในแนวนอนโดยใช้สกรูสองตัวทางด้านขวาและซ้าย สิ่งนี้ช่วยให้จุดใด ๆ ของการเตรียมการวางอยู่ตรงกลางของลานสายตา บนพื้นผิวของเวทีมีที่หนีบสองอันสำหรับยึดการเตรียมการ ในกรณีของขั้นตอนการเคลื่อนที่จะมีช่องสำหรับตัวพาส่งตัวอย่างซึ่งได้รับการแก้ไข (รูปที่ 1)

รูป: 1. แผนภาพของกล้องจุลทรรศน์ "Biolam": 1 - ช่องมองภาพ; 2 - สิ่งที่แนบมาด้วยกล้องสองตา; 3 - อุปกรณ์หมุนเวียน; 4 - เลนส์; 5 - ตารางเรื่อง; 6 - คอนเดนเซอร์; 7 - ตัวเลนส์สะสม; 8 - ที่ใส่หลอดไฟ; 9 - บานพับ; 10 - ที่จับสำหรับขยับแขนคอนเดนเซอร์ 11 - ไมโครสกรู; 12 - มาโครสกรู; 13 - ที่วางท่อ; 14 - สกรูสำหรับยึดหัวฉีด 15 - ไฟแสดงสถานะ; 16 - สวิตช์

ส่วนแสง กล้องจุลทรรศน์ประกอบด้วยอุปกรณ์ส่องสว่างวัตถุประสงค์และเลนส์ใกล้ตา ส่วนที่ส่องสว่างของกล้องจุลทรรศน์ประกอบด้วยคอนเดนเซอร์ที่อยู่ใต้เวทีและไฟส่องสว่างในตัวพร้อมหลอดไส้แรงดันต่ำ คอนเดนเซอร์เป็นระบบออพติคอลของเลนส์สองตัว: พลาโนนูน (บน) และไบคอนเว็กซ์ (ล่าง) คอนเดนเซอร์จะโฟกัสรังสีคู่ขนานที่มาจากแหล่งกำเนิดแสง ณ จุดหนึ่งซึ่งโฟกัสซึ่งควรอยู่ในระนาบของการเตรียม คอนเดนเซอร์ถูกเลื่อนขึ้นและลงโดยใช้สกรูพิเศษที่อยู่ใต้เวที มีไดอะแฟรมม่านตาอยู่ใต้คอนเดนเซอร์และที่ยึดตัวกรองแบบบานพับ ไดอะแฟรมม่านตาทำหน้าที่ดักจับรังสีแสงที่ไม่จำเป็นและช่วยลดรูรับแสงคอนเดนเซอร์ (การครอบคลุมเลนส์มีลักษณะตามจำนวนรังสีที่เข้าสู่เลนส์) เลนส์คอนเดนเซอร์ร่วมกับไดอะแฟรมม่านตาติดตั้งอยู่ในกรอบทรงกระบอก

วัตถุประสงค์คือส่วนที่สำคัญที่สุดของกล้องจุลทรรศน์ ประกอบด้วยระบบของเลนส์กรอบโลหะที่ให้ภาพกลับด้านขยายที่แท้จริง เลนส์ด้านนอกที่หันเข้าหาตัวแบบเรียกว่าเลนส์ส่วนหน้าซึ่งเป็นเลนส์หลักและเลนส์เดียวในเลนส์ที่ให้กำลังขยาย เลนส์ลบคำผิดอยู่เหนือเลนส์ส่วนหน้า มีความโค้งต่างกันและทำจากแก้วที่มีความหนาแน่นของแสงต่างกัน เลนส์ลบคำผิดออกแบบมาเพื่อขจัดข้อผิดพลาดและได้ภาพที่ชัดเจนขึ้น

กล้องจุลทรรศน์มีวัตถุประสงค์ที่ถอดออกได้โดยมีกำลังขยาย 8 x, 40 x และ 90 x (100 x) ของตัวเองซึ่งทำเครื่องหมายบนโครงโลหะ การขยายเลนส์ขึ้นอยู่กับความยาวโฟกัสของเลนส์ด้านหน้าและความโค้ง ยิ่งความโค้งของเลนส์ชิ้นหน้ามากเท่าใดความยาวโฟกัสก็จะยิ่งสั้นลงและกำลังขยายของเลนส์ก็จะยิ่งมากขึ้นเท่านั้น ดังนั้นยิ่งเลนส์ให้กำลังขยายมากเท่าไหร่ก็ควรลดลงเหนือระนาบของการเตรียม

เลนส์ใกล้ตาใช้สำหรับดูภาพของวัตถุขยายด้วยเลนส์และมีเลนส์สองชิ้นคือตา (บน) และเลนส์รวม (ล่าง) กล้องจุลทรรศน์ติดตั้งช่องมองภาพ 5x, 7x, 10x, 12x, 15x และ 20x ตามที่ระบุไว้บนแท่นยึด (5x, 7x, 10x, 12x, 15x และ 20x) แยกแยะระหว่างกล้องจุลทรรศน์แบบโมโนและกล้องสองตา

เพิ่มขึ้นทั้งหมดซึ่งกล้องจุลทรรศน์ให้นั้นพิจารณาจากผลคูณของการขยายวัตถุประสงค์โดยการขยายเลนส์ตา อย่างไรก็ตามการขยายโดยรวมยังไม่ได้บ่งบอกถึงความสามารถทั้งหมดของกล้องจุลทรรศน์ ภาพที่ขยายอาจชัดเจนหรือไม่ชัดเจน ความชัดเจนของภาพที่ได้จะถูกกำหนด ความละเอียด กล้องจุลทรรศน์ - ระยะห่างต่ำสุดระหว่างสองจุดเมื่อยังไม่รวมเป็นหนึ่ง ยิ่งกล้องจุลทรรศน์มีความละเอียดสูงเท่าไหร่ก็จะสามารถมองเห็นวัตถุที่มีขนาดเล็กลงได้

วัตถุขนาดเล็กสามารถดูได้ในระบบสามประเภท: แห้ง - มีอากาศอยู่ระหว่างเลนส์ใกล้วัตถุและวัตถุ น้ำ - มีหยดน้ำระหว่างเลนส์ใกล้วัตถุและวัตถุ - การแช่น้ำ น้ำมัน - เลนส์ใกล้วัตถุถูกจุ่มลงในหยดน้ำมัน - ซีดาร์, ละหุ่ง, ปิโตรเลียมเจลลี่ - การแช่น้ำมัน

กล้องจุลทรรศน์เป็นอุปกรณ์ออพติคอลที่ช่วยให้คุณได้ภาพย้อนกลับของวัตถุที่อยู่ระหว่างการศึกษาและตรวจสอบรายละเอียดเล็ก ๆ ของโครงสร้างซึ่งมีขนาดอยู่นอกความละเอียดของดวงตา

ความละเอียดกล้องจุลทรรศน์ให้ภาพสองเส้นที่แยกจากกันใกล้กัน ตาเปล่าของมนุษย์มีความละเอียดประมาณ 1/10 มม. หรือ 100 ไมครอน กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงที่ดีที่สุดช่วยเพิ่มความสามารถของดวงตามนุษย์ได้ประมาณ 500 เท่านั่นคือความละเอียดประมาณ 0.2 μmหรือ 200 nm

ความละเอียดและการขยายไม่ใช่สิ่งเดียวกัน หากใช้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงจะได้รูปถ่ายสองเส้นที่อยู่ห่างกันน้อยกว่า 0.2 ไมครอนจากนั้นราวกับว่าจะไม่ขยายภาพเส้นจะรวมกันเป็นเส้นเดียว คุณสามารถขยายได้มาก แต่ไม่สามารถปรับปรุงความละเอียดได้

แยกแยะ มีประโยชน์และ เพิ่มขึ้นอย่างไร้ประโยชน์... วิธีที่เป็นประโยชน์เช่นการเพิ่มขึ้นของวัตถุที่สังเกตได้ซึ่งสามารถเปิดเผยรายละเอียดใหม่ของโครงสร้างได้ ไร้ประโยชน์คือการเพิ่มขึ้นซึ่งโดยการขยายวัตถุหลายร้อยครั้งขึ้นไปจะไม่สามารถหารายละเอียดโครงสร้างใหม่ได้ ตัวอย่างเช่นหากภาพที่ได้รับด้วยกล้องจุลทรรศน์ถูกขยายหลายครั้งโดยการฉายลงบนหน้าจอจะไม่มีการเปิดเผยรายละเอียดใหม่ ๆ ของโครงสร้าง แต่จะมีเพียงขนาดของโครงสร้างที่มีอยู่เท่านั้นที่จะเพิ่มขึ้นตามลำดับ

ในห้องปฏิบัติการสอนมักจะใช้ กล้องจุลทรรศน์แสงซึ่งจะตรวจสอบสไลด์โดยใช้แสงธรรมชาติหรือแสงประดิษฐ์ ที่พบมากที่สุด กล้องจุลทรรศน์ชีวภาพแสง:BIOLAM, MIKMED, MBR (กล้องจุลทรรศน์ทำงานทางชีวภาพ), MBI (กล้องจุลทรรศน์วิจัยทางชีววิทยา) และ MBS (กล้องจุลทรรศน์สามมิติทางชีววิทยา) ให้การขยายตั้งแต่ 56 ถึง 1350 เท่า Stereomicroscope(MBS) ให้การรับรู้ไมโครวัตถุแบบสามมิติอย่างแท้จริงและขยายจาก 3.5 ถึง 88 เท่า

สองระบบมีความโดดเด่นในกล้องจุลทรรศน์: ออปติคอลและ เครื่องกลถึง ระบบออปติคอลรวมถึงเลนส์แว่นสายตาและอุปกรณ์ให้แสงสว่าง (คอนเดนเซอร์พร้อมไดอะแฟรมและฟิลเตอร์กรองแสงกระจกหรือแสงไฟฟ้า)

โครงสร้างของกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงแสดงในรูปที่ 1.

รูป: 1. อุปกรณ์ของกล้องจุลทรรศน์แสง:

A - MIKMED-1; B - ไบโอแลม

1 - ช่องมองภาพ, 2 - ท่อ, 3 - ตัวยึดท่อ, 4 - สกรูเล็งหยาบ, 5 - สกรูไมโครมิเตอร์, 6 - ขาตั้ง, 7 - กระจก, 8 - คอนเดนเซอร์, ไดอะแฟรมม่านตาและตัวกรองแสง, 9 - ระยะของวัตถุ, 10 - อุปกรณ์หมุน, 11 - เลนส์ 12 - ตัวเรือนเลนส์สำหรับสะสม 13 - ที่ใส่หลอดไฟ 14 - แหล่งจ่ายไฟ

เลนส์ -หนึ่งในส่วนที่สำคัญที่สุดของกล้องจุลทรรศน์เนื่องจากเป็นตัวกำหนด การขยายที่มีประโยชน์ของวัตถุเลนส์ประกอบด้วยกระบอกโลหะที่มีเลนส์ติดตั้งอยู่ซึ่งจำนวนอาจแตกต่างกันไป กำลังขยายของเลนส์จะแสดงเป็นตัวเลข เพื่อวัตถุประสงค์ทางการศึกษามักใช้เลนส์ x8 และ x40 คุณภาพของเลนส์กำหนดความละเอียด

ช่องมองภาพจัดมาก เลนส์ที่เรียบง่ายกว่า... ประกอบด้วยเลนส์ 2-3 ชิ้นที่ติดตั้งอยู่ในกระบอกโลหะ รูรับแสงคงที่ตั้งอยู่ระหว่างเลนส์ซึ่งกำหนดขอบเขตของมุมมองภาพ เลนส์ส่วนล่างจะโฟกัสภาพของวัตถุซึ่งสร้างโดยเลนส์ในระนาบของไดอะแฟรมและเลนส์ส่วนบนทำหน้าที่สังเกตโดยตรง กำลังขยายของช่องมองภาพจะระบุด้วยตัวเลข: x7, x10, x15 แว่นตาไม่เปิดเผยรายละเอียดโครงสร้างใหม่และในเรื่องนี้การเพิ่มขึ้น เปล่าประโยชน์... ดังนั้นเลนส์ใกล้ตาเหมือนแว่นขยายจึงให้ภาพที่ขยายได้โดยตรงในจินตนาการของวัตถุที่สังเกตซึ่งสร้างขึ้นโดยเลนส์

สำหรับการพิจารณา การขยายด้วยกล้องจุลทรรศน์ทั่วไปคูณการขยายวัตถุประสงค์โดยการขยายช่องมองภาพ

อุปกรณ์ส่องสว่างประกอบด้วยกระจกหรือแสงไฟฟ้าคอนเดนเซอร์ที่มีไดอะแฟรมม่านตาและแผ่นกรองแสงซึ่งอยู่ใต้เวที ออกแบบมาเพื่อให้แสงสว่างแก่วัตถุด้วยลำแสง

กระจกเงาทำหน้าที่นำแสงผ่านคอนเดนเซอร์และการเปิดเวทีไปยังวัตถุ มีสองพื้นผิว: แบนและเว้า กระจกเว้าถูกใช้ในห้องปฏิบัติการที่มีแสงกระจาย

แสงไฟฟ้าติดตั้งภายใต้คอนเดนเซอร์ในซ็อกเก็ตของขาตั้ง

คอนเดนเซอร์ประกอบด้วยเลนส์ 2-3 ชิ้นที่ใส่ในกระบอกโลหะ เมื่อยกหรือลดระดับโดยใช้สกรูพิเศษแสงที่ตกจากกระจกมายังวัตถุจะควบแน่นหรือกระจัดกระจายตามลำดับ

ไดอะแฟรมม่านตาอยู่ระหว่างกระจกและคอนเดนเซอร์ ทำหน้าที่เปลี่ยนเส้นผ่านศูนย์กลางของฟลักซ์แสงที่ส่องโดยกระจกผ่านคอนเดนเซอร์ไปยังวัตถุตามเส้นผ่านศูนย์กลางของเลนส์ด้านหน้าของวัตถุประสงค์และประกอบด้วยแผ่นโลหะบาง ๆ ด้วยความช่วยเหลือของคันโยกพวกเขาสามารถเชื่อมต่อครอบคลุมเลนส์ด้านล่างของคอนเดนเซอร์อย่างสมบูรณ์หรือเจือจางเพื่อเพิ่มการไหลของแสง

แหวนกระจกฝ้าหรือ กรองแสงลดการส่องสว่างของวัตถุ ตั้งอยู่ใต้ไดอะแฟรมและเคลื่อนที่ในแนวนอน

ระบบเครื่องกลกล้องจุลทรรศน์ประกอบด้วยขาตั้งกล่องที่มีกลไกไมโครมิเตอร์และสกรูไมโครมิเตอร์ท่อที่ยึดท่อสกรูเล็งหยาบตัวยึดคอนเดนเซอร์สกรูการเคลื่อนที่ของคอนเดนเซอร์ปืนพกและเวที

ยืนเป็นฐานของกล้องจุลทรรศน์

กล่องกลไกไมโครมิเตอร์ซึ่งสร้างขึ้นจากหลักการโต้ตอบเกียร์ได้รับการแก้ไขเข้ากับขาตั้ง สกรูไมโครมิเตอร์ใช้สำหรับการเคลื่อนที่เล็กน้อยของตัวยึดท่อและด้วยเหตุนี้จึงเป็นไปตามวัตถุประสงค์ที่ระยะทางที่วัดโดยไมโครมิเตอร์ การหมุนสกรูไมโครมิเตอร์เต็มรูปแบบจะเคลื่อนตัวยึดท่อขึ้น 100 µm และการหมุนทีละส่วนจะลดหรือยกตัวยึดท่อขึ้น 2 µm เพื่อหลีกเลี่ยงความเสียหายต่อกลไกไมโครมิเตอร์อนุญาตให้หมุนสกรูไมโครมิเตอร์ไปในทิศทางเดียว ไม่เกินครึ่งรอบ.

หลอดหรือ ท่อ- ทรงกระบอกที่ใส่แว่นสายตาจากด้านบน ท่อเชื่อมต่อกับส่วนหัวของที่ยึดท่อได้อย่างสะดวกโดยยึดด้วยสกรูล็อคในตำแหน่งที่แน่นอน การคลายสกรูล็อคทำให้สามารถถอดท่อออกได้

ปืนพกออกแบบมาเพื่อการเปลี่ยนเลนส์อย่างรวดเร็วที่เสียบเข้ากับซ็อกเก็ต ตำแหน่งกึ่งกลางของเลนส์มาจากสลักที่อยู่ภายในปืนพก

สกรูเล็งหยาบใช้สำหรับการเคลื่อนไหวที่สำคัญของตัวยึดท่อและด้วยเหตุนี้เลนส์เพื่อโฟกัสวัตถุที่กำลังขยายต่ำ

ตารางหัวเรื่องมีไว้สำหรับวางยา มีรูกลมตรงกลางเวทีซึ่งพอดีกับเลนส์ด้านหน้าของคอนเดนเซอร์ มีคลิปสปริงสองอันบนโต๊ะ - คลิปที่ยึดยา

ตัวยึดคอนเดนเซอร์สามารถเคลื่อนย้ายเข้ากับกล่องกลไกไมโครมิเตอร์ สามารถยกขึ้นหรือลดลงได้โดยใช้สกรูที่หมุนล้อเฟืองที่เข้ากับร่องของชั้นวางหวี

ในการศึกษายีสต์แบคทีเรียและราจะใช้กล้องจุลทรรศน์ที่ออกแบบมาเพื่อตรวจสอบการเตรียมโปร่งใสในแสงที่ส่องผ่าน (รูปที่ 8)

ส่วนแสงของกล้องจุลทรรศน์... ส่วนหลักของระบบออปติคอลของกล้องจุลทรรศน์คือเลนส์ที่ขยายภาพของวัตถุ ประกอบด้วยชุดเลนส์ที่ติดกาวด้วยยาหม่องแคนาดาและอยู่ในท่อโลหะ มีเกลียวบนท่อซึ่งเลนส์ถูกขันเข้ากับซ็อกเก็ตพิเศษของปืนพก

ภาพที่กำหนดโดยวัตถุประสงค์จะดูโดยใช้เลนส์ตาที่อยู่ส่วนบนของหลอดกล้องจุลทรรศน์ กล้องจุลทรรศน์ชีวภาพมาพร้อมกับช่องมองภาพที่เปลี่ยนได้สามชิ้น กำลังขยายจะระบุไว้ที่ขอบด้านบนของเลนส์ตา แว่นสายตามักให้กำลังขยาย 7x, 10x และ 15x กำลังขยายทั้งหมดของวัตถุด้วยกล้องจุลทรรศน์เท่ากับผลคูณของการขยายเลนส์ตาคูณกำลังขยายวัตถุ \u003d 900 เท่า

อุปกรณ์ส่องสว่างตั้งอยู่ภายใต้ขั้นตอนของกล้องจุลทรรศน์ประกอบด้วยคอนเดนเซอร์พร้อมไดอะแฟรมม่านตาและกระจก

ส่วนเครื่องกลของกล้องจุลทรรศน์... ชิ้นส่วนนี้ประกอบด้วยขาตั้งกล้องตัวยึดท่อพร้อมปืนพกสกรูสำหรับเคลื่อนย้ายท่อ (แมคโครเมตริกและไมโครเมตริก) อุปกรณ์ส่องสว่างและกล้องจุลทรรศน์ ชิ้นส่วนหลักของขาตั้งกล้องคือส่วนรองรับส่วนล่าง (ขา) ซึ่งทำให้กล้องจุลทรรศน์มีเสถียรภาพและที่ยึดหลอดกล้องจุลทรรศน์

เทคนิคกล้องจุลทรรศน์... ต้องตั้งค่าแสงที่ถูกต้องก่อนที่จะเริ่มใช้กล้องจุลทรรศน์ ในการทำเช่นนี้ให้ถอดเลนส์ใกล้ตาออกจากกล้องจุลทรรศน์และมองเข้าไปในเลนส์โดยตรงให้ตั้งกระจกเพื่อให้มองเห็นแหล่งกำเนิดแสง (หลอดไฟหรือหน้าต่าง) ตรงกลางเลนส์ หลังจากการติดตั้งแสงเบื้องต้นการเตรียมการเสร็จสิ้นจะถูกวางลงบนขั้นตอนของกล้องจุลทรรศน์และยึดด้วยที่หนีบ ใช้สกรูขนาดใหญ่ท่อจะลดลงเกือบจะสัมผัสกับกระจกครอบ จากนั้นมองผ่านช่องมองภาพค่อยๆยกหลอดขึ้นจนภาพปรากฏ ใช้สกรูไมโครมิเตอร์สำหรับโฟกัส

เปิดตาทั้งสองข้างระหว่างกล้องจุลทรรศน์ มองผ่านกล้องจุลทรรศน์ด้วยตาซ้าย

เทคนิคการเตรียมกล้องจุลทรรศน์... หยดของเหลวทดสอบจะถูกนำไปใช้กับสไลด์แก้วที่สะอาดและปิดด้วยกระจกปิดอย่างระมัดระวัง หากการเตรียมนั้นเตรียมจากสารอาหารที่มีความหนาแน่นสูงจากนั้นหยดน้ำสะอาดหยดลงบนสไลด์แก้ววัฒนธรรมที่อยู่ระหว่างการศึกษาจะถูกวางไว้ในนั้นและการเตรียมจะปิดด้วยแก้ว ฟองอากาศไม่ควรอยู่ด้านหลังเนื่องจากรบกวนการทำงานของกล้องจุลทรรศน์ ของเหลวส่วนเกินที่ยื่นออกมาจากกระจกครอบจะถูกนำออกด้วยกระดาษกรองตัดเป็นแถบแคบ ๆ ก่อน การเตรียมการเสร็จสิ้นวางบนเวทีและตรวจสอบ